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文檔簡介
1、白細胞介素2(IL-2)和白細胞介素2受體(IL-2R)的相互作用在調(diào)節(jié)淋巴細胞免疫反應中起著關鍵作用。為了更好地了解IL-2RαNRE特異結合蛋白(NRE-BP)的本質(zhì)，研究人員分別對NRE-BP做了以下兩方面的工作:一、應用肝素親和層析對Jurkat細胞中IL-2RαNRE-BP進行初步分離純化。結果發(fā)現(xiàn)NRE-BP存在于用0.3mol/LKCl的緩沖液H洗脫流出組分中，NRE-BP的結合比活性經(jīng)肝素親和層析后提高3倍;二、應用酵母
2、單雜交系統(tǒng)從HeLa細胞MATCHAKERcDNA文庫中篩選IL-2αNRE-BP的cDNA。1.雙重報告基因菌株HL的建立:研究人員首次應用酵母單雜交系統(tǒng)，嘗試從HeLa細胞cDNA文庫篩選結合NRE-BP的cDNA。然后選擇pHISi-1和pLacZi兩種報告基因載體建立了雙重報告基因菌株HL;2.陽性克的篩選及鑒定:利用HL菌株對HeLa細胞MATCHMAKERcDNA表達文庫進行了三次篩選，從9.6×10<，6>個克隆中，篩得了
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