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文檔簡介
1、目的:以離體海馬腦片作為實驗對象,采用細胞外記錄技術(shù),初步觀察丙泊酚對維生素A缺乏大鼠海馬長時程增強電位的影響。
方法:隨機選取正常和維生素A缺乏SD大鼠,處死后制備海馬腦片,在混合氣體飽和人工腦脊液中孵育2小時,選取較好的腦片進入實驗,腦片分組和處理因素如下:N1組:正常對照組,無維生素A缺乏,不給予丙泊酚處理;N2組:無維生素A缺乏,腦片灌流液中加入丙泊酚至終濃度為50μmol/L;VAD1組:維生素A缺乏模型,不給予
2、丙泊酚處理;VAD2組:維生素A缺乏模型,腦片灌流液中加入丙泊酚至終濃度為50μmol/L。實驗過程中,先以單通道脈沖刺激(測試刺激,波寬0.2ms)誘發(fā)群峰電位(poptdation spike,PS),每隔5 min記錄一次PS幅值,取3次的平均值作為基線值,記錄各組基線值。然后將N2組和VAD2組灌流液更換為含有終濃度為.50μmol/L丙泊酚的人工腦脊液(流速約1ml/min),繼續(xù)給予單通道脈沖刺激(刺激強度及波寬同測試刺激)
3、,每10min一次,觀測誘發(fā)電位1h。然后采新鮮人工腦脊液(aCSF)對丙泊酚充分洗脫,洗脫后給予100 Hz的高頻強直刺激(刺激強度和波寬同測試刺激),靜息10min,再給予測試刺激,每10 min一次,觀測1 h。N1組及VAD1組不予丙泊酚處理,其余實驗操作和觀測記錄與N2組、VAD2組相同,給予強直刺激后,同樣觀測、記錄PS活動1h。
結(jié)果:
予HFS后,與N1組比較,N2組LXP相對幅度受到明顯抑制
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