蒲葵子活性成分及質量控制研究.pdf

1、癌癥嚴重威脅著人類的健康和生命安全，目前發(fā)病率和死亡率均呈逐年上升趨勢。因此，研究高效、低毒的抗癌藥物具有重要意義，而從天然藥物中發(fā)掘抗癌藥物正是目前研究熱點之一。
　　 蒲葵子為棕櫚科植物蒲葵Livistona chinensis (Jacq.) R. Br.的種子，福建民間廣泛用其治療各種癌癥，現(xiàn)代藥理學研究也證實其抗癌療效顯著。然而，對蒲葵子的研究較少，僅見化學成分、粗提物的抗癌活性研究。因此，有必要對蒲葵子進行深入的藥學

2、相關研究，為其抗癌藥用開發(fā)提供基礎和依據(jù)。鑒于此，本文首先進行蒲葵子的生藥學研究；研究各提取部位、組分的抗癌活性；采用HPLC-DPPH 法研究蒲葵子提取物的抗氧化活性，篩選其中的高效抗氧化活性成分峰，并采用液質聯(lián)用鑒定它們的化學結構；對蒲葵子進行植物化學細分工作，并對獲得的化合物進行體外抗癌活性篩選及動物移植瘤體內抗腫瘤驗證實驗；考察蒲葵子主要活性成分的體內藥代動力學行為；建立評價蒲葵子藥材質量的含量測定、指紋圖譜方法等。其主要研究內

3、容及學術貢獻如下：
　　 1、對蒲葵子藥材進行了本草考證，包括原植物形態(tài)、分布地域、藥材性狀、顯微特征、理化鑒定和含量測定等研究，為蒲葵子的藥用提供生藥學資料。
　　 2、對蒲葵子進行初步提取、分離，得到不同極性提取部位；采用體外人腫瘤細胞篩選各部位抗腫瘤活性，證實乙酸乙酯、正丁醇部位抗癌活性較好，并采用移植性實體瘤來驗證其體內抑癌活性；這為后續(xù)的以活性為導向的植物化學細分工作提供了依據(jù)。
　　 3、建立HPLC

4、－DPPH抗氧化活性篩選法，用于天然產物的抗氧化活性成分高效篩選研究。并應用該法首次對蒲葵子中的抗氧化活性成分進行了高通量篩選，證實蒲葵子中有7個主要成分具有強的抗氧化活性。本研究揭示了蒲葵子的抗氧化活性作用，并首次明確了主要的抗氧化活性成分峰，也為天然產物的抗氧化活性成分篩選提供了可行手段。
　　 4、基于HPLC－DPPH的抗氧化活性篩選結果，采用液相色譜-質譜法（LC-MS）分析了主要的抗氧化活性成分峰，解析其質譜碎片，推

5、導其裂解規(guī)律，初步鑒定了總提物中的6個主要抗氧化活性成分，其中有5個成分為首次從該植物中發(fā)現(xiàn)。
　　 5、對蒲葵子提取物進行植物化學細分研究，分離得到了25個化合物。利用1H-NMR，13C-NMR，Mass及IR等光譜分析，鑒定了18個化合物的結構；8個化合物為首次從蒲葵子中分離得到，其中3個化合物為首次從該科植物中分離得到。
　　 6、對分離得到的組分及化合物進行體外抗癌活性篩選，證實苜蓿素具有較好的抑癌細胞生長活性

6、；通過AO/EB熒光染色、DNA斷裂瓊脂糖凝膠電泳分析、免疫組化染色法檢測CDX2的表達、流式細胞儀檢測細胞周期、Western Blot分析Bcl-2和Bax蛋白表達，從而研究苜蓿素對細胞的誘導凋亡作用，并進行體內抗腫瘤活性研究，驗證了其體內抑癌活性。本研究揭示苜蓿素可能是蒲葵子的抗癌作用主要成分之一。
　　 7、建立HPLC法檢測大鼠血漿中苜蓿素濃度的方法，首次研究了口服苜蓿素在大鼠體內的血漿藥代動力學行為。本研究為探明抗癌

7、活性成分苜蓿素的體內過程提供了參考。
　　 8、以分離得到的6個主要化合物作為含量測定指標，建立同時測定6個成分的HPLC-UV方法，并分析了10個不同產地蒲葵子中的6個指標性成分的含量，為該草藥的質量控制提供了的定量評價方法。
　　 9、建立蒲葵子的HPLC-UV指紋圖譜分析方法，考察了方法的精密度、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，并考察了10批多個產地的蒲葵子藥材指紋圖譜一致性，本研究為蒲葵子藥材的鑒別及質量控制提供了較全面的定性評