羌活魚的化學(xué)成分及質(zhì)量控制研究.pdf

1、羌活魚包括山溪鯢（Batrachuperus pinchonii）和西藏山溪鯢（Batrachuperus tibetanu），為小鯢科動物。具有治療胃痛，骨質(zhì)疏松，促進(jìn)骨折愈合等功效，目前相關(guān)研究較少。
　　本文對羌活魚的物種之一西藏山溪鯢的化學(xué)成分進(jìn)行研究，用70％乙醇浸提得總浸膏后，分別用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇萃取，得到不同的極性部位。采用GC-MS技術(shù)分析石油醚部位的揮發(fā)性成分，結(jié)果表明其主要成分為長鏈烷烴，長鏈烷烴乙酯

2、，長鏈烯酸，長鏈烯酸乙酯等；綜合利用硅膠色譜，薄層色譜，高效液相色譜等方法，以及核磁共振等現(xiàn)代波譜技術(shù)，對其乙酸乙酯部位化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)的分離及結(jié)構(gòu)鑒定，現(xiàn)分離得到8個單體化合物，分別為β-谷甾醇（β-sitosterol）（1），2(5H)-呋喃酮（2(5H)-Furanone）（2），尿嘧啶（uracil）（3），胸腺嘧啶（thymine）（4），脫氧尿嘧啶核苷（deoxyuridine）（5），脫氧胸腺嘧啶核苷（deoxythym

3、idine）（6），3-吡啶甲酸（nicotinic acid）（7），鄰苯二甲酸二丁酯（dibutyl phthalate）（8）。均為首次從西藏山溪鯢中分離得到，為西藏山溪鯢的質(zhì)量研究提供良好的實驗基礎(chǔ)。
　　采用醋酸扭體實驗法和熱板法，對西藏山溪鯢的乙醇提取物的鎮(zhèn)痛活性進(jìn)行了初步研究。以體重20±2g的昆明小鼠為研究對象，隨機分為陽性藥組，低劑量、中劑量、高劑量和模型組。阿司匹林2mg/mL為陽性對照，給藥濃度為10、20、

4、40mg/mL，分別給藥7天，第7天給藥40min后測定各組小鼠扭體次數(shù)。分別于給藥后的30、60、90、120min測定各組小鼠痛閥值。結(jié)果表明西藏山溪鯢給藥組（20、40mg/mL）能顯著減少小鼠扭體次數(shù)（P<0.05或P<0.01），且呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性；但對熱板法痛閥值的提高無明顯作用。結(jié)果表明西藏山溪鯢僅對外周神經(jīng)痛有作用，對中樞神經(jīng)痛無效，從而為其鎮(zhèn)痛活性研究奠定基礎(chǔ)。
　　對羌活魚及其混偽品無斑肥源和截趾虎的線粒

5、體基因COI進(jìn)行PCR擴(kuò)增及雙向測序，得到對應(yīng)的COI基因序列。通過CodonCode Aligner5.0軟件進(jìn)行序列分析比對，根據(jù)序列差異，利用Primer Premier5.0軟件設(shè)計特異性引物SJYW1和SJYW2，改變復(fù)性溫度及循環(huán)數(shù)以得到特異性的反應(yīng)條件。結(jié)果表明，當(dāng)復(fù)性溫度為54℃，25個循環(huán)時，正品羌活魚在約350bp處有明顯擴(kuò)增帶，而混偽品無斑肥源和截趾虎沒有擴(kuò)增帶。本實驗具有較高的特異性、重復(fù)性，可用于羌活魚的鑒別。