電針對MCAO大鼠腦皮質(zhì)臂板蛋白3a和軸突生長導(dǎo)向因子-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察局灶性腦梗死大鼠皮質(zhì)軸突生長導(dǎo)向因子-1(netrin-1，Ntn1)和臂板蛋白3a(semaphorin-3a，sema3a)的表達(dá)及電針干預(yù)對其表達(dá)的影響。探索Ntn1與sema3a在電針對腦梗后神經(jīng)可塑性影響中的作用。
　　方法:將135只雄性Sprague-Dawle(SD)大鼠分為正常組(n=15)、模型組(n=60)及電針組(n=60)。利用線栓法制作大腦中動脈閉塞(middlecerebral artery

2、 occlusion，MCAO)模型，并行l(wèi)onga評分。2，3，5—氯化三苯基四氮唑(TTC)染色與蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining，HE)染色確定造模成功。電針選穴“內(nèi)關(guān)”(PC6)，“足三里”(ST36)，刺激參數(shù)為疏密波，頻率80～100Hz，強(qiáng)度以保持針刺局部輕微顫抖為度，留針30 min。電刺激在大鼠麻醉蘇醒后90 min進(jìn)行。分別在術(shù)后1d、3d、7d、14d時，對術(shù)后大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能

3、評分(modified neurologic severity scores，mNSS)，利用免疫組化檢測缺血側(cè)大腦腦皮質(zhì)中Ntn1、sema3a、神經(jīng)絲蛋白200(NF200)分布和表達(dá)，免疫印跡法檢測缺血側(cè)大腦皮質(zhì)Ntn1和sema3a的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:免疫組化結(jié)果顯示在各個時相點(diǎn)大鼠腦皮質(zhì)均表達(dá)Ntn1和 sema3a，主要集中在細(xì)胞質(zhì)陽性表達(dá)。Westernblot檢測結(jié)果顯示，與正常組相比，模型組Ntn1蛋白的表達(dá)

4、水平在腦梗死后1d即開始明顯上升(P＜0.01)，3d時呈上升趨勢(P＜0.01)，7d時達(dá)峰值(P＜0.01)，14d時仍顯著高于基礎(chǔ)水平(P＜0.01)，電針組與模型組相比，Ntn1蛋白表達(dá)趨勢相同，但表達(dá)量明顯高于模型組，術(shù)后1d、3d、7d、14d時有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05，P＜0.01).與正常組相比，模型組sema3a蛋白的表達(dá)水平在術(shù)后1d即開始上升(P＜0.01)，7d時達(dá)高峰(P＜0.01)，14d時仍高于基礎(chǔ)水平(

5、P＜0.01)。同時相點(diǎn)電針組與模型組相比sema3a均呈現(xiàn)低表達(dá)，1d、3d和7d、14d時有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05，P＜0.01)，峰值同樣在7d時出現(xiàn)。Western blot檢測結(jié)果與免疫組化分析結(jié)果基本相符。7d、14d時電針組與模型組相比mNSS評分存在統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，14d時電針組與模型組相比NF200的表達(dá)量存在統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論局灶性腦梗死后大鼠皮質(zhì)Ntn1與sema3a表達(dá)明顯