電針對非酒精性脂肪肝大鼠相關(guān)蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、背景:
　　非酒精性脂肪肝目前已成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，這與目前飲食結(jié)構(gòu)改變、生活方式變化、壓力增大等密切相關(guān)。西醫(yī)認(rèn)為，非酒精性脂肪肝是一種以無過量飲酒史的肝組織中蓄積大量脂肪（大多是甘油三酯）的代謝綜合征。其病理改變主要是以肝細(xì)胞發(fā)生顯著脂肪變性為特點(diǎn)的脂肪代謝障礙疾病，發(fā)病機(jī)理至今尚未完全明確。中醫(yī)認(rèn)為，本病屬于中醫(yī)“肥胖”、“痰飲”、“積聚”等范疇。多因過食肥甘厚膩、感受濕熱毒邪、情志失調(diào)等致病，與痰瘀互結(jié)、肝脾

2、失調(diào)有關(guān)。目前，西醫(yī)治療本病尚無特效藥物且效果不佳。因此，從中醫(yī)角度研究非酒精性脂肪肝，運(yùn)用電針治療本病具有十分重要的臨床價值。
　　目的:
　　本課題旨在研究電針對非酒精性脂肪肝大鼠消痰化瘀，調(diào)和肝脾和調(diào)節(jié)脂類代謝等方面的影響，并綜合前期實(shí)驗(yàn)研究，為開發(fā)一個安全有效的針刺方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，同時也可為本病的治療提供一種新思路。本實(shí)驗(yàn)從基因及蛋白質(zhì)表達(dá)入手進(jìn)行研究，還可為后期研究細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法:<

3、br>　　取SD大鼠44只，雌性，體質(zhì)量(180±20)g，將大鼠隨機(jī)分配為:正常組、模型組、東寶肝泰組、電針組，每組11只。正常組食用標(biāo)準(zhǔn)飼料，其余各組均采用高脂高膽固醇飼料（含2％膽固醇、10％豬油及88％基礎(chǔ)飼料）喂養(yǎng)8周。造模成功后，東寶肝泰組按0.9g/kg灌服，每日給藥1次，共治療28天;電針組采用“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”穴治療，頻率為1.5-2Hz，疏密波，電壓9V，電流強(qiáng)度1-3mA，留針20min，1日1次，連續(xù)2

4、8天。用比色法測定肝臟勻漿丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TC)、總膽固醇(TG)等的含量;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)的含量;免疫組化法(SP)肝組織Fas、FasL、細(xì)胞角蛋白18(CK18)等蛋白的表達(dá)情況;用實(shí)時熒光定量法(RT-PCR)測定半胱氨酸蛋白酶8（Caspase-8）蛋白的表達(dá)水平并用蛋白免疫印跡法(WB)測定過氧化物酶體增殖激活物受體-α

5、(PPAR-α)、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c（SREBP-1c）、肝X受體-α(LXR-α)等蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　對肝功能的影響:與正常組比較，模型組大鼠體重增加，精神萎靡，活動較少，肝臟顏色發(fā)黃變淡，有油膩感。模型組大鼠肝臟勻漿SOD、GSH含量明顯降低(P＜0.01)，MDA、TC、TG含量明顯增加(P＜0.01);與模型組比較，電針組、東寶肝泰組大鼠肝臟勻漿SOD、GSH含量增加(P＜0.01)，MDA、T

6、C、TG含量明顯降低(P＜0.01);電針組療效優(yōu)于東寶肝泰組(p＜0.01或p＜0.05)。提示電針刺激“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”對非酒精性脂肪肝大鼠肝功能有改善作用。
　　對肝臟脂質(zhì)代謝的影響:與正常組比較，模型組大鼠血清RBP4含量明顯增加(P＜0.01)，肝組織PPARα蛋白表達(dá)明顯降低(P＜0.01)，LXR-α和SREBP-1c蛋白表達(dá)水平增高(P＜0.01);與模型組比較，電針組、東寶肝泰組大鼠血清RBP4含量降低

7、，肝組織PPARα蛋白表達(dá)明顯升高(P＜0.01)，LXR-α和SREBP-1c蛋白表達(dá)水平降低(P＜0.01或P＜0.05)，電針組優(yōu)于東寶肝泰組。提示電針、東寶肝泰對改善非酒精性脂肪肝大鼠脂肪酸及膽固醇代謝有促進(jìn)作用，電針優(yōu)于東寶肝泰。
　　對肝組織損傷的修復(fù)作用:與正常組相比，模型組大鼠肝組織Fas、FasL表達(dá)量增加(P＜0.05)，caspase-8RNA相對表達(dá)量降低(P＜0.05);與模型組相比，電針組、東寶肝泰組大