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文檔簡介
1、背景:
非酒精性脂肪肝目前已成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病,這與目前飲食結(jié)構(gòu)改變、生活方式變化、壓力增大等密切相關(guān)。西醫(yī)認(rèn)為,非酒精性脂肪肝是一種以無過量飲酒史的肝組織中蓄積大量脂肪(大多是甘油三酯)的代謝綜合征。其病理改變主要是以肝細(xì)胞發(fā)生顯著脂肪變性為特點(diǎn)的脂肪代謝障礙疾病,發(fā)病機(jī)理至今尚未完全明確。中醫(yī)認(rèn)為,本病屬于中醫(yī)“肥胖”、“痰飲”、“積聚”等范疇。多因過食肥甘厚膩、感受濕熱毒邪、情志失調(diào)等致病,與痰瘀互結(jié)、肝脾
2、失調(diào)有關(guān)。目前,西醫(yī)治療本病尚無特效藥物且效果不佳。因此,從中醫(yī)角度研究非酒精性脂肪肝,運(yùn)用電針治療本病具有十分重要的臨床價值。
目的:
本課題旨在研究電針對非酒精性脂肪肝大鼠消痰化瘀,調(diào)和肝脾和調(diào)節(jié)脂類代謝等方面的影響,并綜合前期實(shí)驗(yàn)研究,為開發(fā)一個安全有效的針刺方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),同時也可為本病的治療提供一種新思路。本實(shí)驗(yàn)從基因及蛋白質(zhì)表達(dá)入手進(jìn)行研究,還可為后期研究細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
方法:<
3、br> 取SD大鼠44只,雌性,體質(zhì)量(180±20)g,將大鼠隨機(jī)分配為:正常組、模型組、東寶肝泰組、電針組,每組11只。正常組食用標(biāo)準(zhǔn)飼料,其余各組均采用高脂高膽固醇飼料(含2%膽固醇、10%豬油及88%基礎(chǔ)飼料)喂養(yǎng)8周。造模成功后,東寶肝泰組按0.9g/kg灌服,每日給藥1次,共治療28天;電針組采用“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”穴治療,頻率為1.5-2Hz,疏密波,電壓9V,電流強(qiáng)度1-3mA,留針20min,1日1次,連續(xù)2
4、8天。用比色法測定肝臟勻漿丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TC)、總膽固醇(TG)等的含量;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)的含量;免疫組化法(SP)肝組織Fas、FasL、細(xì)胞角蛋白18(CK18)等蛋白的表達(dá)情況;用實(shí)時熒光定量法(RT-PCR)測定半胱氨酸蛋白酶8(Caspase-8)蛋白的表達(dá)水平并用蛋白免疫印跡法(WB)測定過氧化物酶體增殖激活物受體-α
5、(PPAR-α)、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c(SREBP-1c)、肝X受體-α(LXR-α)等蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:
對肝功能的影響:與正常組比較,模型組大鼠體重增加,精神萎靡,活動較少,肝臟顏色發(fā)黃變淡,有油膩感。模型組大鼠肝臟勻漿SOD、GSH含量明顯降低(P<0.01),MDA、TC、TG含量明顯增加(P<0.01);與模型組比較,電針組、東寶肝泰組大鼠肝臟勻漿SOD、GSH含量增加(P<0.01),MDA、T
6、C、TG含量明顯降低(P<0.01);電針組療效優(yōu)于東寶肝泰組(p<0.01或p<0.05)。提示電針刺激“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”對非酒精性脂肪肝大鼠肝功能有改善作用。
對肝臟脂質(zhì)代謝的影響:與正常組比較,模型組大鼠血清RBP4含量明顯增加(P<0.01),肝組織PPARα蛋白表達(dá)明顯降低(P<0.01),LXR-α和SREBP-1c蛋白表達(dá)水平增高(P<0.01);與模型組比較,電針組、東寶肝泰組大鼠血清RBP4含量降低
7、,肝組織PPARα蛋白表達(dá)明顯升高(P<0.01),LXR-α和SREBP-1c蛋白表達(dá)水平降低(P<0.01或P<0.05),電針組優(yōu)于東寶肝泰組。提示電針、東寶肝泰對改善非酒精性脂肪肝大鼠脂肪酸及膽固醇代謝有促進(jìn)作用,電針優(yōu)于東寶肝泰。
對肝組織損傷的修復(fù)作用:與正常組相比,模型組大鼠肝組織Fas、FasL表達(dá)量增加(P<0.05),caspase-8RNA相對表達(dá)量降低(P<0.05);與模型組相比,電針組、東寶肝泰組大
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