類鼻疽桿菌慢性感染BALB-c小鼠模型的建立及評價.pdf

1、目的:
　　類鼻疽伯克霍爾德菌（Burkholderia pseudomallei，BP，簡稱類鼻疽桿菌）是一種與植物、動物和人類感染均密切相關的環(huán)境寄生菌，通常存在于疫區(qū)的土壤和水中，伺機感染宿主，導致一種名為類鼻疽的疾病。近年來的研究數(shù)據(jù)表明，類鼻疽是一種正在擴散的人獸共患傳染病。
　　類鼻疽桿菌作為一種胞內(nèi)感染病原，感染宿主后能夠長期定植于機體內(nèi)，引起宿主感染，并造成臟器典型的病理改變。類鼻疽桿菌引起的感染在臨床上主要

2、分為急性感染和慢性感染，其中慢性感染最為常見，并容易引起持續(xù)性的病理損傷。因此本研究擬建立一種類鼻疽桿菌病慢性感染BALB/c小鼠模型，以期為類鼻疽桿菌致病機制研究、疫苗研發(fā)以及藥物評價奠定基礎。
　　方法:
　　1.不同劑量類鼻疽桿菌滴鼻感染BALB/c小鼠后密切監(jiān)測42天，探索合適的攻毒劑量。
　　2.低劑量(3.3×102CFU)感染小鼠后第21、28、35和42天，涂板和Q-PCR計數(shù)小鼠血液、肝臟、脾臟和肺臟

3、中細菌的定植量。
　　3.HE染色觀察肝臟、脾臟和肺臟等主要臟器的病理學改變，免疫熒光檢測病理組織中有無類鼻疽桿菌。
　　4.ELISA法檢測感染小鼠血清炎性因子TNF-α、 IFN-γ的表達水平及血清類鼻疽桿菌特異性IgG抗體滴度。
　　結(jié)果:
　　1.3.3×102CFU類鼻疽桿菌滴鼻感染BALB/c小鼠后，第21天、28天、35天和42天生存率分別為90％、90％、70％和60％，且感染率＞90％。

4、　　2.小鼠被低劑量類鼻疽桿菌感染后體重不斷下降，肝臟、脾臟、肺臟及血液中均有類鼻疽桿菌定植，且脾臟定植量最高。
　　3.感染21天后小鼠肝臟、脾臟和肺臟等臟器出現(xiàn)大量壞死灶和膿腫灶，伴炎性細胞浸潤和纖維素性滲出等病理改變，且免疫熒光檢測到脾臟中存在類鼻疽桿菌。
　　4、從感染后21天起，小鼠血清中特異性IgG抗體的幾何平均滴度(GMT)持續(xù)增高，且增幅達到4倍以上;實驗組小鼠與對照組小鼠相比，血清炎性因子TNF-α和IFN