卵裂球丟失對凍融胚胎移植結局的影響及子代臍血淋巴細胞的轉錄組分析.pdf

1、凍融胚胎移植（Frozen-thawed embryo transfer, FET）已成為輔助生殖技術(Assisted reproductive technology, ART)的一個重要組成部分。伴隨而來的卵裂球丟失問題也日益受到關注，之前的研究對卵裂球丟失是否會對胚胎的發(fā)育產生影響存在著爭議。關于子代圍生期結局，先前的研究多見于凍融胚胎和新鮮胚胎移植的比較，而針對卵裂球丟失的研究甚少。近年來新興的轉錄組測序技術RNA-Seq可有助

2、于我們獲得大量關于FET出生子代的遺傳信息，從而揭示相關分子機理。本研究通過大樣本的臨床資料分析和轉錄組學研究，旨在評價卵裂球丟失對凍融胚胎移植結局及子代圍生期結局的影響，為FET的臨床合理應用提供依據(jù)。
　　第一部分卵裂球丟失對凍融胚胎移植結局影響及子代圍生期結局比較
　　目的:研究凍融胚胎過程中卵裂球的丟失是否會對胚胎的種植和發(fā)育以及子代圍生期結局產生影響。
　　方法:回顧性分析了2005年1月至2012年12月在

3、四大生殖中心進行的5573例FET周期，所有移植的胚胎均丟失至少一個卵裂球的周期納入丟失組(N=1860)，所有移植的胚胎卵裂球均完整的周期納入完整組(N=3713)，比較分析了兩組間的種植率、妊娠率和活產率等相關移植結局。同時對其中所有的丟失組單胎子代(N=269)、完整組單胎子代(N=687)和其他自然妊娠的單胎子代(N=1762)的圍生期結局進行了比較和分析。
　　結果:在凍融胚胎移植結局的比較上，丟失組在種植率、化學妊娠率

4、、臨床妊娠率和活產率等方面均顯著低于完整組，但兩組的異位妊娠率和流產率無顯著性差異。關于單胎活產子代的圍生期結局，早產率、剖宮產率和大于胎齡兒(Largefor gestational age，LGA)的發(fā)生率在丟失組和完整組均顯著高于自然妊娠組，而小于胎齡兒(Small for gestational age，SGA)的發(fā)生率則在丟失組中明顯高于完整組和自然妊娠組。
　　結論:胚胎凍融過程中卵裂球的丟失會降低胚胎的發(fā)育潛能，且會

5、增加小于胎齡兒發(fā)生的風險。同時凍融胚胎會導致大于胎齡兒發(fā)生的風險增加，其機理尚待進一步研究。
　　第二部分卵裂球丟失和完整的凍融胚胎與自然妊娠子代的轉錄組學研究
　　目的:采用RNA-Seq的方法進一步研究凍融胚胎及卵裂球丟失對子代臍血淋巴細胞轉錄組的改變，從轉錄組水平分析差異表達基因對子代造成的影響。
　　方法:研究對象為在本院行FET后于2012年6月至2013年5月分娩的單胎子代，其中由卵裂球丟失胚胎發(fā)育而來的納

6、入丟失組，由卵裂球完整胚胎發(fā)育而來的納入完整組，同時隨機選取符合條件的自然妊娠單胎子代納入自然妊娠組。收集臍帶血并提取淋巴細胞后，對每組各5例進行了轉錄組測序，并對有顯著表達差異的基因（Differentially expressed gene，DEG）進行了功能分析。
　　結果:從臍帶血淋巴細胞中我們一共檢測到9427個轉錄本，丟失組和自然妊娠組之間有92個DEGs，完整組和自然妊娠組之間只有2個DEGs，這些基因大部分與細胞的