臍血T淋巴細(xì)胞免疫學(xué)特性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:自60年代以來(lái),造血干細(xì)胞移植(HSCT)在治療血液系統(tǒng)惡性疾病、實(shí)體瘤及某些先天遺傳性疾病等方面取得了巨大成功.目前用于臨床移植的造血干細(xì)胞來(lái)源主要有三種:骨髓、外周血和臍血.臍血作為骨髓、外周血后的第三種造血干細(xì)胞的來(lái)源,以其資源優(yōu)勢(shì)、獨(dú)特的生物學(xué)特性,可進(jìn)行HLA1-3個(gè)位點(diǎn)不合的同胞及無(wú)關(guān)供者間的移植,移植后移植排斥(HVGR)及移植物抗宿主病(GVHD)的發(fā)生率低且程度輕,能使受者全面地重建造血及免疫功能等優(yōu)點(diǎn)<'[1]

2、>,正日益受到人們關(guān)注.臍血移植HVGR和GVHD發(fā)生率低、程度輕的原因和機(jī)制目前還不十分清楚<'[2]>.由于移植免疫主要與T淋巴細(xì)胞有關(guān),因此該題對(duì)臍血T淋巴細(xì)胞的免疫學(xué)特性進(jìn)行了以下研究,對(duì)臍血干細(xì)胞移植HVGR和GVHD的部分機(jī)制進(jìn)行探討.方法:1.采用甲基纖維素半固體培養(yǎng)法測(cè)定臍血和成人外周血T淋巴細(xì)胞集落(CFU-TL)的產(chǎn)率.2.采用淋巴細(xì)胞液體培養(yǎng)法,即以臍血和成人外周血單個(gè)核細(xì)胞3×10<'9>/L加入含20﹪牛血清,

3、100mg/L PHA的IMDM的培養(yǎng)體系內(nèi)培養(yǎng),分別在48小時(shí)、72小時(shí)收集上清,用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中IL-4、IFN-γ的誘生水平.3.臍血T淋巴細(xì)胞對(duì)成人T淋巴細(xì)胞的抑制實(shí)驗(yàn):將男嬰臍血淋巴細(xì)胞與成人女性淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng)作為實(shí)驗(yàn)組,將成人男性淋巴細(xì)胞與成人女性淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng)作為對(duì)照組.培養(yǎng)72小時(shí)后常規(guī)方法制備染色體,進(jìn)行Q分帶,觀察具有Y染色體的核分裂象所占的百分率.結(jié)論:1.臍血CFU-TL的形成能力低于外

4、周血,提示臍血的T淋巴細(xì)胞存在增生水平較低的內(nèi)在缺陷,決定了其功能欠成熟,對(duì)組織配型不符的HLA抗原有一定的免疫耐受性,可能為臍血移植GVHD發(fā)生率低且程度輕的機(jī)制之一.2.臍血淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4的水平明顯低于外周血,臍血IL-4/IFN-γ比值明顯高于外周血IL-4/IFN-γ比值.提示臍血的細(xì)胞免疫功能低下,與成人比較呈現(xiàn)Th2相對(duì)優(yōu)勢(shì)狀態(tài),有一定的免疫耐受能力,為臍血移植后GVHD發(fā)生低下的可能機(jī)制之一.3.