深低溫凍存對臍血單個核細胞免疫特性影響的研究.pdf

1、本文研究了凍存過程對臍血造血細胞免疫表型和細胞因子分泌量的影響，為臍血的臨床移植提供實驗依據(jù)。 方法：18例臍血標本經(jīng)比重為1.077的Ficoll-Hypaque分離液分出單個核細胞(MNC)后，分成三組，即新鮮標本對照組、DMSO對照組及低溫凍存組。低溫凍存組加二甲亞砜(終濃度為10％)，經(jīng)程控降溫后放-196℃液氮保存，凍存30天后在40℃的水浴中快速復蘇。復蘇后其它兩組一樣進行細胞計數(shù)、臺盼藍拒染率檢測；通過流式細胞儀用

2、單克隆抗體檢測單個核細胞中CD4+、CD8+細胞亞群的比例；并經(jīng)PHA刺激，培養(yǎng)72小時，用ELISA法檢測培養(yǎng)上清液中白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-6(IL-6)、γ-干擾素(IFN-γ)及粒-巨細胞集落刺激因子(GM-CSF)的含量。 結果：臺盼藍拒染率比新鮮標本對照組有所下降(t=7.55,P＜0.01)。細胞亞群CD4+細胞比例明顯升高(t=-2.83～-2.73，P＜0.05)。IL-2、IL-6及IFN-γ

3、三種細胞因子檢測結果，除IL-6與新鮮標本對照組比較差別不具統(tǒng)計學意義外，其它均有所上升(t=-7.91～-2.60，P＜0.01或P＜0.05)。GM-CSF與DMSO對照組無差別，而與新鮮標本對照組比較檢測結果有下降現(xiàn)象(t=7.74，P＜0.01)。 結論：凍存造成了淋巴細胞亞群及細胞因子分泌量的變化，這一現(xiàn)象表明，凍存提高了臍血造血細胞的免疫功能。在臍血移植后，這可能有利于機體早期免疫機能的重建，提高抗感染、抗腫瘤的能力