低分子量魚精蛋白的制備與評價.pdf

1、硫酸魚精蛋白作為抗肝素藥物被中華人民共和國藥典(2010年版)收錄，臨床主要適用于肝素中毒的解救。硫酸魚精蛋白通過注射給藥，但其屬外源蛋白，易引起過敏等不良反應，在使用時會受到諸多限制。低分子量魚精蛋白(Low Molecular Weight Protamine，LMWP)是一段來源于魚精蛋白的多肽，可以酶解硫酸魚精蛋白制備。LWMP保留了魚精蛋白抗肝素的能力，同時又具有類似于TAT、寡聚精氨酸的穿膜肽性質，能與口服難吸收的大分子藥物

2、形成復合物，從而促進大分子藥物的口服吸收。
　　本論文從LMWP的檢測制備、制備純化和體內外實驗等方面進行研究，建立了LMWP的檢測方法，建立、完善制備工藝，采用物理混合的方式制備LMWP-胰島素復合物，并驗證其具有提高胰島素生物利用度的作用，為后續(xù)口服胰島素給藥系統(tǒng)的開發(fā)提供參考，主要結論如下：
　　1)建立了LMWP的含量測定方法，比較了UPLC和HPLC這兩種檢測方法，發(fā)現(xiàn)UPLC法優(yōu)于HPLC法，并選擇UPLC法為后

3、續(xù)實驗中LMWP的檢測方法；
　　2)建立并優(yōu)化了LMWP的制備和純化的方法，經鑒定，制備純化后的產物為高純度LMWP；
　　3)通過Caco-2細胞模型建立的細胞攝取和轉運試驗，證明胰島素與LMWP結合后，相對于胰島素有更高的攝取和轉運率，MTT實驗證明，LMWP在整個課題實驗中使用的濃度范圍內沒有細胞毒性；
　　4)通過利用大鼠在體腸吸收模型，證明LMWP-胰島素復合物在小腸部位可被吸收，并具有降血糖作用，降血糖效