小麥低分子量麥谷蛋白亞基基因的克隆及序列分析.pdf_第1頁(yè)
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1、該研究以普通六倍體小麥PH82-2-2為材料,對(duì)其低分子量麥谷蛋白的基因進(jìn)行研究,研究結(jié)果如下:1.根據(jù)Genebank上登記的從原始小麥和硬粒小麥的低分子量麥谷蛋白基因兩端的保守序列設(shè)計(jì)引物,以小麥葉片為材料提取DNA用PCR進(jìn)行目的基因的擴(kuò)增.優(yōu)化擴(kuò)增的反應(yīng)體系,得到9個(gè)目的片段,其大小在700-1500bp之間.2.對(duì)得到的目的基因進(jìn)行克隆測(cè)序,推導(dǎo)蛋白質(zhì)序列,進(jìn)行N端,C端和重復(fù)序列的比較.N端和C端的序列是高度保守,其差別僅僅

2、是單個(gè)殘基的替換或缺失.重復(fù)序列的主要的重復(fù)單元為PFSQQQ重復(fù)次數(shù)在1-11之間,其他還存在個(gè)別基因的重復(fù)單元如QPVLPQPILPQQ PⅢL,重復(fù)次數(shù)在2-3之間.重復(fù)單元不同和重復(fù)單元的插入和缺失是造成基因序列大小差異的主要原因.并根據(jù)其Cys殘基的不同將9個(gè)基因分成6類,討論了Cys殘基在品質(zhì)中所起的作用,得到普通小麥中低分子量麥谷蛋白(LMW)亞基的一般結(jié)構(gòu)模型.3.將得到的序列和已知同源序列相比較確定了各基因在染色體上的

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