兒童營(yíng)養(yǎng)不良血清低分子量蛋白質(zhì)譜圖研究.pdf

1、目的:蛋白質(zhì)-熱能營(yíng)養(yǎng)不良(protein—energy malnutrition,PEM)是由于缺乏能量和(或)蛋白質(zhì)所致的一種營(yíng)養(yǎng)缺乏癥,主要見(jiàn)于<3歲嬰幼兒。PEM臨床表現(xiàn):體重不增以致減輕是營(yíng)養(yǎng)不良的最初表現(xiàn)。病程持久時(shí)身長(zhǎng)(高)也是低于正常。皮下脂肪層不充實(shí)或完全消失。其順序依次為腹部,其次為胸-背-腰部,然后上肢-下肢-臀部,最后額-頸-面頰部。皮下脂肪大量消失時(shí),皮膚變得干燥、蒼白、松弛及出現(xiàn)皺紋、失去彈性、腸型可見(jiàn)。肌肉

2、發(fā)育不良,肌張力低下,或偶爾增高。運(yùn)動(dòng)發(fā)育遲緩,智力落后,體溫降低,心音低鈍、節(jié)律不齊、血壓偏低、呼吸表淺。遠(yuǎn)期可影響智力及運(yùn)動(dòng)素質(zhì)的發(fā)展。因此,兒童期的PEM應(yīng)引起足夠重視。迄今,沒(méi)有明確的實(shí)驗(yàn)室參數(shù)能早期診斷PEM。
　　 蛋白質(zhì)組學(xué)(Proteomics),是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一門(mén)新興學(xué)科,通過(guò)分析研究健康與疾病狀態(tài)的組織、細(xì)胞群和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)線粒體中蛋白質(zhì)的變化,其以細(xì)胞內(nèi)全部蛋白質(zhì)的存在及其活動(dòng)方式為研究對(duì)象,研究細(xì)胞在不

3、同的生理或病理?xiàng)l件下表達(dá)蛋白的異同,分析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)功能和蛋白質(zhì)之間的相互關(guān)系,并從而找出功能蛋白質(zhì)和特異蛋白質(zhì),進(jìn)一步闡明疾病的發(fā)病機(jī)制,并在深入研究的基礎(chǔ)上針對(duì)靶點(diǎn)定向合成有效的治療藥物。本實(shí)驗(yàn)采用蛋白芯片結(jié)合表面增強(qiáng)激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(surface enhanced laser desorption／ionization-time offlight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技術(shù)檢測(cè)PE

4、M治療前及PEM治療后組中表達(dá)具有顯著差異的蛋白質(zhì)尤其是低分子量蛋白或多肽,希望找到能對(duì)PEM早期診斷具有參考意義的血清蛋白,為早期診斷PEM和PEM治療提供參考依據(jù),使患兒能夠盡早得到治療。本研究旨在探討蛋白組學(xué)在PEM中的應(yīng)用價(jià)值,找出差異蛋白,為治療提供可選擇的方法。
　　 方法:應(yīng)用SELDI-TOF-MS技術(shù)來(lái)分析檢測(cè)結(jié)合在蛋白質(zhì)芯片上的血清蛋白質(zhì),共獲得68例標(biāo)本的血清低分子量蛋白表達(dá)指紋圖譜,其中56例為PEM血清

5、蛋白表達(dá)指紋圖譜,12例為PEM治療后血清蛋白表達(dá)指紋圖譜。結(jié)果:在分子質(zhì)量／電荷比值(質(zhì)荷比,mass electron ratio,M／Z)為2000-20000范圍,PEM與PEM治療組間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)的蛋白質(zhì)峰有5個(gè),在治療前后蛋白表達(dá)量((x)±S)依次是5314.4(42.23±4.09:27.35±4.51)、6417.8(10.05±2.76；30.05±4.23)、6616.9(20.02±3.42:

6、34.03±6.23)、7742.8(57.45±9.72；39.57±4.15)、10216.5(47.45±9.63；31.75±2.73),其中M／Z為5314.4(42.23±4.09；27.35±4.51)、7742.8(57.45±9.72；39.57±4.15)、10216.5(47.45±9.63；31.75±2.73)在PEM組中高表達(dá)；而M／Z為6417.8(10.05±2.76；30.05±4.23)、6616.9