彩色馬鈴薯試管薯誘導(dǎo)及遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、馬鈴薯(Solanum tuberosum L.)是重要的糧菜兼用和工業(yè)原料作物，是人們?nèi)粘ｏ嬍车闹匾M成部分。目前，馬鈴薯生產(chǎn)過程中病蟲害等問題很大程度上限制了馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。同時(shí)，市場對馬鈴薯品質(zhì)的要求越來越高，以及中國加入世界貿(mào)易組織后馬鈴薯產(chǎn)業(yè)所面臨的問題都給馬鈴薯的育種工作提出了新的課題。
　　 本研究以彩色馬鈴薯粉色品種‘Cherie’為實(shí)驗(yàn)材料，研究了不同消毒方式對無菌苗體系建立的影響，對試管薯誘導(dǎo)的一系列因素進(jìn)

2、行了優(yōu)化;同時(shí)以葉片和試管薯薄片為外植體，用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將GFP： UPM1基因?qū)氩噬R鈴薯，并對影響馬鈴薯遺傳轉(zhuǎn)化的因素包括激素種類與濃度、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、侵染時(shí)間、共培養(yǎng)時(shí)間、抗生素濃度、篩選方式等進(jìn)行研究，優(yōu)化了馬鈴薯再生體系和遺傳轉(zhuǎn)化體系。主要研究結(jié)果如下:
　　 1、馬鈴薯再生體系及試管薯誘導(dǎo)體系的建立，外植體消毒方式為75％酒精30s，0.1％ HgCl2+2％吐溫溶液處理6min;無菌苗的最佳壯苗方式1/2MS+活性

3、炭0.5g/L+KH2PO4200mg/L;誘導(dǎo)試管薯的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA5.0mg/L+活性炭0.5g/L+矮壯素600mg/L，培養(yǎng)條件為弱光(2000Lx，14h/d)培養(yǎng)15d后暗培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為26℃。
　　 2、馬鈴薯高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立，通過EHA105農(nóng)桿菌介導(dǎo)將GFP：UPM1基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯葉片及試管薯薄片中，其中以預(yù)培養(yǎng)2d、OD600=0.6的菌液侵染6min、共培養(yǎng)2d、250mg/L羧芐青霉素

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