異丙酚麻醉下電針抗腦缺血損傷及代謝調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、腦血管疾病是神經(jīng)系統(tǒng)常見(jiàn)病和多發(fā)病,死亡率約占所有疾病的10％,是目前人類疾病三大死亡原因之一,其中缺血性卒中約占全部腦卒中的70％。此外,臨床常見(jiàn)心肺腦復(fù)蘇和低血壓休克等往往可因供血不足而造成全腦缺血再灌注損傷,搶救成功后繼發(fā)性腦缺血再灌注損傷也成為研究的熱點(diǎn)。腦缺血再灌注損傷是一個(gè)十分復(fù)雜的病理生理過(guò)程,探索缺血再灌注損傷的機(jī)理及有效的治療方法,做到既盡早恢復(fù)缺血組織的血流,又減輕或防止缺血再灌注損傷的發(fā)生,是缺血性腦損傷防治中亟待

2、解決的重要課題。
　　 針灸是祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中重要的一部分。電針技術(shù)將電子科技與傳統(tǒng)手工針灸結(jié)合起來(lái),使針灸更加易于實(shí)施。電針(electroacupuncture,EA)療法在腦缺血性疾病的治療中已經(jīng)顯示出了良好的效果,可以有效改善患者的預(yù)后,促進(jìn)患者的康復(fù)。目前的研究認(rèn)為,電針治療腦缺血療效確切。針刺對(duì)缺血性腦損傷具有多水平、多通道、多靶點(diǎn)的保護(hù)和干預(yù)作用。督脈是奇經(jīng)八脈主體之一,是人體諸陽(yáng)之總匯,有“總督諸陽(yáng)”和“陽(yáng)脈之?！?/p>

3、之說(shuō),“病變?cè)谀X,首取督脈”為治療腦缺血性疾病的首選。
　　 臨床上采用針刺治療疾病時(shí),往往會(huì)產(chǎn)生疼痛,從而不利于康復(fù)。進(jìn)針和電流刺激時(shí),患者的疼痛主要來(lái)自皮膚,因?yàn)樵谡嫫?nèi)有豐富的感覺(jué)神經(jīng)末梢,當(dāng)神經(jīng)末梢受到超強(qiáng)刺激時(shí),就可以引起機(jī)體反應(yīng),從而感到疼痛。疼痛程度和刺激強(qiáng)度、刺激作用時(shí)間以及刺激的頻率有關(guān)。針刺疼痛使患者恐慌,并引起應(yīng)激反應(yīng)。氧化應(yīng)激在缺血再灌注損傷中起關(guān)鍵作用,是造成腦缺血/再灌注不可逆損傷的重要因素之一。再灌

4、注損傷引起氧化應(yīng)激、鈣超載和炎性因子大量生成。鈣超載與炎性因子生成同時(shí)又都與氧化應(yīng)激互相促進(jìn)。鈣超載和氧化應(yīng)激直接攻擊神經(jīng)細(xì)胞,造成了腦組織損傷。
　　 異丙酚因其起效快與蘇醒迅速、完全的特性,而成為目前門(mén)診手術(shù)中應(yīng)用最多的靜脈麻醉藥。在異丙酚鎮(zhèn)靜的狀態(tài)下實(shí)施電針治療,不僅解除了患者對(duì)電針治療不適感,減輕了應(yīng)激,同時(shí)在異丙酚鎮(zhèn)靜麻醉下,使得更高強(qiáng)度電針的應(yīng)用成為可能。不同的刺激量作用于機(jī)體產(chǎn)生不同的效應(yīng)。
　　 腦缺血性

5、損傷發(fā)生后腦血流的降低可減少氧和葡萄糖的輸送,引起組織能量代謝的紊亂,如無(wú)氧酵解的活化、有氧氧化的抑制等,最終導(dǎo)致組織內(nèi)乳酸的堆積和三磷酸腺苷(adenosinetriphosphate,ATP)生成的降低,從而引起組織酸中毒和能量衰竭。乳酸是無(wú)氧代謝的特異性產(chǎn)物,其水平的變化可反映組織氧化代謝狀態(tài)和組織酸中毒的程度。腦組織線粒體一直被認(rèn)為是神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)能量轉(zhuǎn)化的中心,最新的研究表明線粒體在神經(jīng)細(xì)胞死亡的調(diào)控中起著重要作用。腦缺血再灌注后

6、導(dǎo)致的腦細(xì)胞能量代謝障礙和ATP耗竭為ATP酶活性下降的主要原因。若能預(yù)防或減輕因缺血再灌注引起的ATP含量和ATP酶活性的降低,則有可能防止神經(jīng)質(zhì)膜功能的衰竭和缺血再灌注腦損傷的發(fā)生發(fā)展。
　　 本研究前期的實(shí)驗(yàn)通過(guò)復(fù)制大鼠四血管央閉法腦缺血再灌注模型,然后在水合氯醛或異丙酚的麻醉下給予電針刺激大鼠百會(huì)穴、命門(mén)穴及足三里穴,觀察在不同的麻醉藥物作用下,從腦糖代謝和能量代謝、抗炎及抗氧化應(yīng)激三個(gè)方面評(píng)估電針對(duì)大鼠的腦保護(hù)作用,以

7、及麻醉對(duì)電針治療作用的影響。后期的實(shí)驗(yàn)通過(guò)復(fù)制大鼠四血管夾閉法腦缺血再灌注模型,在異丙酚麻醉下電針刺激大鼠百會(huì)穴、命門(mén)穴及足三里穴,觀察在異丙酚鎮(zhèn)靜麻醉下,不同強(qiáng)度電針抗腦缺血性損傷的作用,探討異丙酚麻醉下,不同強(qiáng)度電針對(duì)腦缺血再灌注模型大鼠腦超微結(jié)構(gòu)、腦糖代謝和能量代謝、胰島功能以及腦細(xì)胞線粒體功能的影響。
　　 實(shí)驗(yàn)研究
　　 第一章異丙酚在電針治療大鼠腦缺血再灌注損傷中抗氧化應(yīng)激作用的研究
　　 活性氧自由

8、基損害是大腦缺血-再灌注損傷的主要機(jī)制,尋找有效的腦氧化損傷保護(hù)劑對(duì)于防治IR具有重要的意義。靜脈麻醉藥異丙酚對(duì)各種因素所致的氧化應(yīng)激有抑制作用,在減輕大鼠腦IR中有一定的保護(hù)作用,此部分研究通過(guò)觀察異丙酚麻醉下全腦缺血再灌注損傷后大鼠腦組織MDA和SOD含量和PPAR-γmRNA表達(dá)的變化,以及異丙酚麻醉下電針“百會(huì)”“命門(mén)”和“足三里”穴對(duì)MDA、SOD及PPAR-γmRNA表達(dá)的影響,探討異丙酚在電針治療大鼠腦缺血再灌注損傷中抗氧

9、化應(yīng)激作用。選取雄性SD大鼠40只,隨機(jī)分為五組,即:水合氯醛+腦缺血.再灌注組(CL+CI/R組)、水合氯醛+腦缺血-再灌注+電針組(CL+CI/R+EA組)、丙泊酚+腦缺血-再灌注組(P+CI/R組)、丙泊酚+腦缺血-再灌注+電針組(P+CI/R+EA組)、假手術(shù)組(SH組),每組8只。采用四血管阻塞法建立大鼠全腦缺血模型,于再灌流開(kāi)始后,CL+CFR+EA組和P+CI/R+EA組電針“百會(huì)”“命門(mén)”和“足三里”穴,電針參數(shù):頻率3

10、0～50Hz,間斷疏密波,電流強(qiáng)度1mA,以局部肌肉輕微震顫為度,時(shí)間20min。在缺血后24h,測(cè)定腦組織中的MDA和SOD含量和PPAR-γmRNA的表達(dá)變化。結(jié)果顯示,缺血再灌注24h后,與SH組比較,CL+CI/R組大鼠腦組織勻漿中的SOD含量明顯降低(P＜0.05)、MDA含量明顯增加(P＜0.01);與CL4-CI/R組比較,CL+CI/R+EA組和P+CFR+EA組大鼠腦組織中的SOD含量明顯增加(P＜0.05),P+CU

11、FF組和P+CUFF+EA組MDA含量明顯降低(P＜0.01);與P+CUFF組比較,P+CI/R+EA組大鼠腦組織中的SOD含量明顯增加(P＜0.05);與CL+CI/R+EA組比較,P+CI/R組和P+CI/R+EA組MDA含量明顯降低(P＜0.01)。各組大鼠腦組織MDA含量及PPARγmRNA表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(r=0.664,P＜0.01)。結(jié)果表明,電針能使腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織中的SOD含量明顯增加,而異丙酚可以顯著

12、降低MDA含量及PPAR-γmRNA表達(dá),具有抗氧化應(yīng)激作用,MPO活性及PPARγmRNA表達(dá)的變化具有內(nèi)在的相關(guān)性。
　　 總結(jié)
　　 本研究將麻醉藥物異丙酚引入到電針治療中,輔助電針治療,增強(qiáng)電針的治療效果。通過(guò)異丙酚麻醉下的電針腦保護(hù)作用研究,探討麻醉與電針結(jié)合是否能抑制氧化應(yīng)激、抗炎作用和改善腦細(xì)胞能量代謝,是否有利于更好地發(fā)揮電針的腦保護(hù)作用。
　　 本研究前期的實(shí)驗(yàn)通過(guò)復(fù)制大鼠四血管央閉法腦缺血再灌

13、注模型,然后在水合氯醛或異丙酚的麻醉下給予電針刺激大鼠百會(huì)穴、命門(mén)穴及足三里穴,從腦氧糖代謝、抗炎及抗氧化應(yīng)激三個(gè)方面,比較分別在異丙酚和水合氯醛鎮(zhèn)靜麻醉下,電針對(duì)大鼠的抗腦缺血性損傷作用,以及探討麻醉對(duì)電針治療作用可能的影響。后期的實(shí)驗(yàn)通過(guò)復(fù)制大鼠四血管央閉法腦缺血再灌注模型,觀察在異丙酚鎮(zhèn)靜麻醉下,不同強(qiáng)度電針刺激大鼠百會(huì)穴、命門(mén)穴及足三里穴,探討不同強(qiáng)度電針對(duì)腦缺血再灌注模型大鼠腦超微結(jié)構(gòu)、腦糖代謝和能量代謝、胰島功能以及腦細(xì)胞線

14、粒體功能的影響。
　　 前期的研究結(jié)果顯示,麻醉下電針同樣具有良好的腦保護(hù)作用,尤其表現(xiàn)在調(diào)節(jié)腦糖代謝和能量代謝方面,異丙酚也表現(xiàn)出了在抗炎和抗氧化應(yīng)激方面的腦保護(hù)作用,異丙酚和電針聯(lián)合應(yīng)用于腦保護(hù)時(shí),可能產(chǎn)生協(xié)同的作用。后期的研究進(jìn)一步考察了在異丙酚麻醉下,不同強(qiáng)度電針對(duì)腦糖代謝和能量代謝的影響。結(jié)果顯示,不同強(qiáng)度的電針對(duì)缺血再灌注損傷的腦細(xì)胞糖代謝和能量代謝的影響不同,電針強(qiáng)度太小,治療作用弱,效果差,但電針強(qiáng)度過(guò)大,刺激太

15、強(qiáng),增加了機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng),同樣會(huì)影響治療效果。
　　 3mA強(qiáng)度的電針具有較佳的調(diào)節(jié)腦細(xì)胞糖氧代謝、能量代謝和受損胰島功能的作用,而5mA強(qiáng)度的電針通過(guò)調(diào)節(jié)腦細(xì)胞線粒體內(nèi)能量代謝的重要酶,增強(qiáng)了葡萄糖的有氧代謝水平,抑制了無(wú)氧酵解,改善腦組織能量代謝狀態(tài),但同時(shí)也增加了機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng),影響了治療效果。電針強(qiáng)度的選擇應(yīng)在避免或減輕不良應(yīng)激作用的前提下,盡量選擇較高的治療強(qiáng)度,以期獲得更加滿意的治療效果。本研究結(jié)果證實(shí)了異丙酚結(jié)合3