心肺復蘇后大鼠腦組織SSAT2與HIF-lalpha表達的動態(tài)變化規(guī)律.pdf

1、第一部分:大鼠心肺復蘇模型的建立
　　 目的:建立一種穩(wěn)定的大鼠心肺復蘇模型。
　　 方法:成年SD大鼠66只,隨機數字法分為正常對照組8只,假手術組8只,復蘇組50只。復蘇組從頸外靜脈彈丸式注射氯化鉀致大鼠心搏驟停,持續(xù)5min后進行胸外按壓和機械通氣。假手術組只進行經口氣管插管和血管內置管。監(jiān)測基本生命體征,記錄自主循環(huán)恢復時間,對復蘇后24h、72h的進行神經功能評分,觀察正常對照組、假手術組和復蘇后1h、12h、

2、72h各時間點的腦組織病理形態(tài)學變化。
　　 結果:大鼠注入氯化鉀后立即出現循環(huán)停止,自主循環(huán)恢復時間為(343.6±120.2)s,自主循環(huán)恢復率為80％(40/50),24h存活率為76%,72h存活率為74%。復蘇后24h神經功能評分為(64.73±1.66)分,72h為(73.19±1.33)分。復蘇后1h腦組織缺血缺氧性損傷最重,24h次之,72h逐漸好轉。
　　 結論:本模型穩(wěn)定可靠,操作簡便且易于復蘇,最明

3、顯的改進之處在于采用經口氣管插管法來最大限度地減少組織損傷和對機體的影響,從而更加適合于心肺復蘇后期的腦復蘇研究。
　　 第二部分:精脒/精胺-N1-乙酰基轉移酶2、HIF-1α在心肺復蘇后大鼠腦組織表達的動態(tài)變化規(guī)律
　　 目的:研究心肺復蘇后大鼠腦組織中精脒/精胺-N1-乙?；D移酶2(spermidine/spennine-N1-acetyltransferase2,SSAT2)與缺氧誘導因子-1α(bypoxia

4、 inducible factor1 alpha,HIF-1α)表達的動態(tài)變化規(guī)律,分析二者相關性。
　　 方法:88只成年SD大鼠隨機數字法分為正常對照組、假手術組和心肺復蘇組。其中假手術組和心肺復蘇組再分為1、8、24、48、72h5個亞組,每亞組8只。采用RT-PCR、Western blot方法分別檢測腦組織中HIF-1αmRNA和HIF-1α、SSAT2蛋白的表達。
　　 結果:SSAT2的表達在復蘇后明顯降低

5、,1h(0.314±0.027,P＜0.01)表達最低,隨后下降趨勢逐漸減弱(P＜0.01),至72h(0.731±0.024,P＞0.05)時恢復到正常對照組水平(0.736±0.020),而假手術組SSAT2的表達與正常對照組相比無顯著變化(P＞0.05)。HIF-1αmRNA的表達在復蘇后1h(0.245±0.021,P＜0.05)時降低,但8h(0.430±0.019,P＜0.05)時明顯增強,24h(0.387±0.018,P

6、＜0.05)、48h(0.385±0.019,P＜0.05)輕度增加,至72h時回落到正常對照組水平(0.343±0.022):但HIF-1α蛋白表達水平在復蘇后1h(0.755±0.012,P＜0.01)顯著增高,隨后增高趨勢逐漸減緩(P＜0.01),至72h(0.033±0.002,P＜0.01)時僅輕度增高,而在正常對照組和假手術組未能檢測出HIF-1α表達。SSAT2表達與HIF-1α表達在復蘇后72h內呈負性相關(r=-0.9

7、45,P＜0.001),SSAT2表達與HIF-1αmRNA表達在復蘇后8～48h呈負相關(r=-0.614,P=0.001)。
　　 結論:在心肺復蘇后72h內,大鼠腦組織HIF-1α蛋白表達升高且升高趨勢逐漸減弱,SSAT2表達下降且下降趨勢逐漸放緩;復蘇后8～48h時,HIF-1αmRNA表達增加且增加趨勢逐漸減緩。SSAT2與HIF-1α、HIF-1αmRNA表達呈負相關且變化趨勢相反,提示SSAT2對HIF-1α、HI