大鼠心肺復(fù)蘇后心肌損傷相關(guān)血漿microRNA的表達(dá)變化研究.pdf

1、目的:
　　采用窒息法建立大鼠心搏驟停-心肺復(fù)蘇(CA-CPR)模型，通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(RT-PCR)檢測大鼠心肺復(fù)蘇(CPR)后心肌損傷相關(guān)血漿微小核糖核酸(microRNA)的表達(dá)變化，初步探討心肌損傷與血漿microRNA表達(dá)變化的關(guān)系，并進(jìn)一步探討血漿microRNA作為心肌損傷標(biāo)志物的可能性。
　　方法:
　　成年雄性Sprague-Dauley(SD)大鼠64只，體重270g-330g之間，采用隨機(jī)

2、數(shù)字表法將其分成兩組(N=32)，假手術(shù)對(duì)照組（A組）、心搏驟停-心肺復(fù)蘇組（B組），每組再按氣管切開后（A組）或自主循環(huán)恢復(fù)(ROSC)后（B組）3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)分為4個(gè)亞組（即A3、A6、A12、A24、B3、B6、B12、B24組，n=8）。B組采用窒息法建立CA-CPR模型，A組僅施行麻醉，氣管切開，血管穿刺等操作，不窒息、不復(fù)蘇。各亞組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)取靜脈血，低溫離心后取血漿放置在-80℃冰箱保存，用于提取總R

3、NA，通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測心肌損傷相關(guān)血漿miR-1、miR-21、miR-126、miR-133a、miR-208a、miR-210、miR-320、及miR-499的表達(dá)水平，以2-△△Ct計(jì)算microRNA的相對(duì)表達(dá)量，并以相對(duì)于A組microRNA的表達(dá)升高5倍或下調(diào)0.2倍為明顯變化的標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)果:
　　與A組相比較，B組大鼠候選microRNA在各時(shí)間點(diǎn)均有明顯的變化，miR-1，miR-133a，

4、miR-499在各時(shí)間點(diǎn)的相對(duì)表達(dá)量均明顯上升，其中miR-1、miR-133a在ROSC后6小時(shí)相對(duì)表達(dá)量最高，miR-499在ROSC后12h相對(duì)表達(dá)量最高。miR-126在3h、6h、12h的相對(duì)表達(dá)量均出現(xiàn)明顯下調(diào)，而在24h則出現(xiàn)上調(diào)趨勢，miR-21在各時(shí)間點(diǎn)均出現(xiàn)明顯下調(diào)趨勢，其在ROSC后12h相對(duì)表達(dá)量最低。miR-210、miR-320在3h、6h、12h的相對(duì)表達(dá)量均出現(xiàn)上調(diào)趨勢，而在24h其相對(duì)表達(dá)量則出現(xiàn)下調(diào)。

5、miR-208a在假手術(shù)組中未檢測到表達(dá)（Ct值＞40），而在CA-CPR后ROSC組則檢測到其存在，四個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測到的Ct值分別為34.25±0.76,33.75±0.64,35.93±0.58,37.76±0.96(P＜0.05或0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.大鼠CA-CPR后心肌損傷相關(guān)血漿miRNA相對(duì)表達(dá)量有明顯的變化。
　　2.大鼠CA-CPR后心肌損傷相關(guān)血漿miRNA的相對(duì)表達(dá)量在不同時(shí)間點(diǎn)有不同的