重組人促紅細胞生成素對白血病細胞增殖的影響.pdf

1、本文研究目的：檢測重組人促紅細胞生成素(recolnbnlant human erythropoietin，rhEPO)對白血病細胞增殖的影響，為臨床應用rhEPO治療白血病繼發(fā)貧血提供一定的實驗依掘。 研究方法：病例來源于2006年10月26日至2007年1月30日山西省人民醫(yī)院及山西醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院門診及住院初治、未緩解及復發(fā)急性白血病(acute leukemja，AL)患者(白血病細胞>50％并排除M<,6>)30例

2、，均經(jīng)骨髓穿刺檢查、免疫分型、染色體及融合基因檢查確診。其中男15例，女15例，年齡5-63歲，平均年齡29±17歲，包括急性髓細胞性白血病(acute myelogenous leukemia，AML)21例，急性淋巴細胞性白血病(acutelymphocytic．leukemia，ALL)9例。①用EDTA抗凝管抽取骨髓或外周皿2ml后沿管壁搖勻。用淋巴細胞分離液分離單個核細胞(MNC)，提取單個核細胞，吸取核細胞層，D-Hank’

3、s液洗滌兩遍，加紅細胞裂解液去除單個核細胞中紅細胞。加RPMI 1640培養(yǎng)液配制成1×10<'6>/L終濃度的MNC懸液，形態(tài)學觀察并計數(shù)；②將細胞接種于24孔培養(yǎng)板，根據(jù)預實驗結果，按實驗設計每孔分別加入10u、20u rhEP0，不加藥組作為空白對照，放置于37℃，5％CO<,2>培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別于24h、72h收集細胞。③取不同時間培養(yǎng)的細胞懸液500μl，1000r/min離心5min,棄上清，混勻細胞取20μl涂片，進行形

4、態(tài)學觀察并計數(shù)；采用流式細胞儀檢測不同濃度rhEP0體外對白血病細胞作用后，在不同時間(24h、72h)CD71的表達及對細胞周期的影響。 研究結果：30例急性白血病患者骨髓細胞分別給予10u、20u rhEPO，經(jīng)24h、72h培養(yǎng)，倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)無明顯變化，各組間細胞計數(shù)無顯著差異，P>0.05：30例患者均有CD71抗原的表達，不同濃度、不同時間比較無顯著差異，P>0.05。AML與ALL組間比較CD71抗原表達