重組人促紅細(xì)胞生成素對(duì)白血病細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、本文研究目的：檢測(cè)重組人促紅細(xì)胞生成素(recolnbnlant human erythropoietin，rhEPO)對(duì)白血病細(xì)胞增殖的影響，為臨床應(yīng)用rhEPO治療白血病繼發(fā)貧血提供一定的實(shí)驗(yàn)依掘。 研究方法：病例來源于2006年10月26日至2007年1月30日山西省人民醫(yī)院及山西醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院門診及住院初治、未緩解及復(fù)發(fā)急性白血病(acute leukemja，AL)患者(白血病細(xì)胞>50％并排除M<,6>)30例

2、，均經(jīng)骨髓穿刺檢查、免疫分型、染色體及融合基因檢查確診。其中男15例，女15例，年齡5-63歲，平均年齡29±17歲，包括急性髓細(xì)胞性白血病(acute myelogenous leukemia，AML)21例，急性淋巴細(xì)胞性白血病(acutelymphocytic．leukemia，ALL)9例。①用EDTA抗凝管抽取骨髓或外周皿2ml后沿管壁搖勻。用淋巴細(xì)胞分離液分離單個(gè)核細(xì)胞(MNC)，提取單個(gè)核細(xì)胞，吸取核細(xì)胞層，D-Hank’

3、s液洗滌兩遍，加紅細(xì)胞裂解液去除單個(gè)核細(xì)胞中紅細(xì)胞。加RPMI 1640培養(yǎng)液配制成1×10<'6>/L終濃度的MNC懸液，形態(tài)學(xué)觀察并計(jì)數(shù)；②將細(xì)胞接種于24孔培養(yǎng)板，根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)每孔分別加入10u、20u rhEP0，不加藥組作為空白對(duì)照，放置于37℃，5％CO<,2>培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別于24h、72h收集細(xì)胞。③取不同時(shí)間培養(yǎng)的細(xì)胞懸液500μl，1000r/min離心5min,棄上清，混勻細(xì)胞取20μl涂片，進(jìn)行形

4、態(tài)學(xué)觀察并計(jì)數(shù)；采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度rhEP0體外對(duì)白血病細(xì)胞作用后，在不同時(shí)間(24h、72h)CD71的表達(dá)及對(duì)細(xì)胞周期的影響。 研究結(jié)果：30例急性白血病患者骨髓細(xì)胞分別給予10u、20u rhEPO，經(jīng)24h、72h培養(yǎng)，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)無明顯變化，各組間細(xì)胞計(jì)數(shù)無顯著差異，P>0.05：30例患者均有CD71抗原的表達(dá)，不同濃度、不同時(shí)間比較無顯著差異，P>0.05。AML與ALL組間比較CD71抗原表達(dá)