運動對AMPK不同基因型小鼠骨骼肌HDAC5-MEF2的影響.pdf

1、組蛋白脫乙?；?(Histone deacetylase5,HDAC5)是Ⅱa型HDACs家族一員，在哺乳動物骨骼肌內(nèi)含量豐富。作為轉(zhuǎn)錄因子MEF2的轉(zhuǎn)錄共遏制因子，HDAC5可通過對染色質(zhì)組蛋白乙酰化水平的修飾，抑制MEF2在靶基因啟動子區(qū)域的轉(zhuǎn)錄。體外實驗表明，在運動模擬信號AICAR刺激下，AMPK可磷酸化HDAC5并促使HDAC5轉(zhuǎn)移出核，解除對MEF2的抑制，在體實驗也發(fā)現(xiàn)運動后HDAC5與MEF2的結(jié)合減少，伴有HDAC5

2、轉(zhuǎn)移出核，但無在體實驗直接證明AMPK、HDAC5和MEF2三者之間的關(guān)系。
　　研究目的：由于運動可激活A(yù)MPK，本實驗對AMPKα2三種基因型鼠進行四周耐力訓(xùn)練，通過測定骨骼肌中HDAC5、MEF2的相關(guān)指標(biāo)，探討AMPKα2在運動調(diào)節(jié)HDAC5和MEF2結(jié)合中的作用。
　　研究方法：兩月齡C57BL/6J野生(WT)、AMPKα2基因高表達(OE)和AMPKα2基因敲除(KO)小鼠各20只，分別隨機分為安靜對照組和耐力

3、訓(xùn)練組，每組10只。以12m/min的速度每天跑臺訓(xùn)練1小時，持續(xù)訓(xùn)練四周后，免疫共沉淀法測定股四頭肌細胞核中HDAC5與MEF2的結(jié)合量，western blot法測定細胞核HDAC5蛋白含量以及細胞總HDAC5蛋白含量。
　　結(jié)果：四周耐力訓(xùn)練后，(1)三種小鼠骨骼肌HDAC5與MEF2結(jié)合量與安靜對照組相比均顯著降低，且各訓(xùn)練組間無顯著差異。(2)三種小鼠骨骼肌細胞核內(nèi)HDAC5含量與安靜對照組相比均顯著降低，TO組與TW組

4、間出現(xiàn)顯著差異(P<0.05)。(3)三種小鼠骨骼肌總HDAC5含量與安靜對照組相比均無顯著變化。
　　結(jié)論：(1)四周耐力訓(xùn)練引起AMPKα2三種基因型鼠骨骼肌細胞核內(nèi)HDAC5-MEF2結(jié)合減少以及HDAC5轉(zhuǎn)移出核；(2)AMPKα2轉(zhuǎn)基因高表達鼠與野生鼠相比，四周耐力訓(xùn)練后骨骼肌細胞核內(nèi)HDAC5蛋白表達顯著減少；(3)AMPKα2基因敲除鼠與野生鼠相比，四周耐力訓(xùn)練后骨骼肌細胞核內(nèi)HDAC5與MEF2結(jié)合量、核內(nèi)及總HD