力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷對大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外增殖及AMPK-TSC2-mTOR的影響.pdf

1、目的:研究力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷對大鼠肌衛(wèi)星細(xì)胞及AMPK、TSC2、mTOR的影響，探究骨骼肌損傷修復(fù)過程，為骨骼肌損傷修復(fù)提供理論依據(jù)。
　　方法:選取24只SD雄性大鼠，隨機(jī)分成4組，每組6只。分別是安靜對照組(Control，C)6只;力竭運(yùn)動(dòng)組(Exhaustive exercise group)18只:力竭運(yùn)動(dòng)組進(jìn)行一次力竭性下坡跑運(yùn)動(dòng)達(dá)到力竭狀態(tài)，并取即刻組(Exhaustive，EO)、力竭后24h組(E24)、力竭后4

2、8h組(E48)。力竭組和安靜對照組分別于力竭運(yùn)動(dòng)后不同時(shí)間點(diǎn)和安靜狀態(tài)下麻醉，宰殺取血，并取下右側(cè)股四頭肌，股四頭肌一分為二，一份立即進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，一份-80°保存待檢測AMPK、TSC2、mTOR的含量及變化。鈍挫傷組:另選6只SD雄性大鼠，分為鈍挫傷即刻組(Contusion，D0)、鈍挫傷24h組(D24)、鈍挫傷48h組(D48)，進(jìn)行麻醉，摘取右側(cè)股四頭肌，立即進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。另取新生鼠3只，亦取股四頭肌進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)

3、驗(yàn)。
　　結(jié)果:1、根據(jù)肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示:安靜對照組無明顯肌衛(wèi)星細(xì)胞出現(xiàn);力竭組與鈍挫傷組相比肌衛(wèi)星細(xì)胞含量較少，增殖速度相對緩慢，鈍挫傷組肌衛(wèi)星細(xì)胞含量較多，且增殖速度快于力竭組，兩者之間差異較明顯。結(jié)果可見，到第五天時(shí)各組開始大量增殖，第七天時(shí)達(dá)到增殖的高峰，隨后增殖速度下降。新生鼠組肌衛(wèi)星細(xì)胞含量較高，增殖速度最快，培養(yǎng)第二天便可見梭形細(xì)胞，之后便大量增殖。
　　2、ELISA結(jié)果顯示:力竭運(yùn)動(dòng)即刻組骨骼肌、血清

4、中AMPK、TSC2含量較對照組明顯上升，且有極顯著差異(P＜0.01);力竭后24h、48h組骨骼肌、血清中AMPK、TSC2含量較對照組無明顯變化。力竭運(yùn)動(dòng)即刻組骨骼肌、血清中mTOR含量較對照組明顯下降，差異極顯著(P＜0.01);力竭后24h、48h組骨骼肌、血清中mTOR含量較對照組無明顯變化。且E24組與E48組間均無顯著性差異。
　　結(jié)論:1、肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示，力竭運(yùn)動(dòng)與鈍挫傷相比，鈍挫傷對骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞有較好

5、的激活作用，雖然兩者都能使骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞激活，而對照組則無明顯肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)出，說明成年大鼠在安靜狀態(tài)下骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞處于靜息狀態(tài)。力竭組與鈍挫傷組相比較，鈍挫傷組肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖更快、更明顯，說明鈍挫傷組損傷更嚴(yán)重，刺激更強(qiáng);新生鼠在未受刺激的條件下，其衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量更多，增殖能力更強(qiáng)，表明新生鼠體內(nèi)的肌衛(wèi)星細(xì)胞并未處于靜息狀態(tài)。
　　2、力竭運(yùn)動(dòng)即刻組的AMPK、TSC2含量明顯高于其余各組，而mTOR含量則低于其余各組，且有顯著