低氧訓(xùn)練對AMPK不同基因型小鼠骨骼肌HIF-1α表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　目前關(guān)于低氧及低氧運(yùn)動對作為能量感受器的AMPK和作為氧感受器HIF-1之間的關(guān)系報(bào)道較少，主要集中于體外培養(yǎng)癌細(xì)胞等。因此本實(shí)驗(yàn)通過AMPK三種不同基因型小鼠，探討四周低氧、運(yùn)動、以及低氧訓(xùn)練對HIF-1α蛋白表達(dá)的影響，以進(jìn)一步了解低氧和運(yùn)動訓(xùn)練對骨骼肌能量代謝信號的調(diào)節(jié)機(jī)制。
　　方法：
　　C57BL/6J野生小鼠（ Wild-type, WT）、AMPKα2高表達(dá)轉(zhuǎn)基因鼠(over-express

2、ion, OE)和AMPKα2基因敲除鼠（Knockout, KO)各40只，隨機(jī)分為常氧對照組（control，C），常氧耐力訓(xùn)練組(endurance training, T），低氧對照組（hypoxia,H）和低氧訓(xùn)練組（hypoxia Training，T）,每組各10只小鼠。低氧方案：低氧對照組和低氧訓(xùn)練組持續(xù)四周間歇性低氧，每周連續(xù)六天，每天8小時(shí)低氧暴露，氧氣濃度模擬4500米左右海拔高度，氧濃度約為11％。運(yùn)動方案：常氧

3、訓(xùn)練組和低氧訓(xùn)練組進(jìn)行坡度為零，跑速12m/min的跑臺訓(xùn)練，每周連續(xù)訓(xùn)練6天，每天訓(xùn)練1小時(shí)，持續(xù)四周。低氧訓(xùn)練組跑臺訓(xùn)練的一小時(shí)在低氧環(huán)境下完成。常氧對照組小鼠飼養(yǎng)房內(nèi)正常飼養(yǎng)。訓(xùn)練組小鼠最后一次訓(xùn)練后12小時(shí)取材。Western Blot法測定骨骼肌總HIF-1α和核內(nèi)HIF-1α。
　　結(jié)果：
　　四周常氧耐力訓(xùn)練、低氧及低氧訓(xùn)練后，WT、OE、KO鼠HIF-1α總蛋白、核蛋白與常氧安靜組相比均有顯著性增加，其中低氧

4、耐力組的核蛋白有非常顯著性增加，OE鼠骨骼肌細(xì)胞內(nèi)HIF-1α總蛋白和核蛋白均高于相應(yīng)的WT鼠，有顯著性差異。KO鼠和WT鼠相比沒有顯著性差異。
　　結(jié)論：
　?。?）常氧耐力訓(xùn)練、低氧及低氧訓(xùn)練可以增加小鼠骨骼肌HIF-1α總蛋白和核蛋白的表達(dá)；
　　（2）AMPKα2轉(zhuǎn)基因鼠總蛋白、核蛋白HIF-1α表達(dá)變化與野生鼠相比顯著性增加，說明AMPKα2的高表達(dá)對HIF-1α的穩(wěn)定，核轉(zhuǎn)位起到了促進(jìn)作用；
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