蘆筍老莖堆肥中嗜熱細菌和霉菌的初步研究.pdf

1、蘆筍老莖是一種不同于稻草、麥稈等秸稈的原料，所以其堆制發(fā)酵期間的微生物群落及其演替變化也必然不同于其他原料的堆肥。如果要建立和完善針對蘆筍老莖這一堆肥的堆制發(fā)酵工藝，進而得到一種高質(zhì)量的蘑菇培養(yǎng)料，關(guān)于蘆筍老莖堆制發(fā)酵期間微生物的研究是非常必要的。本文對蘆筍老莖堆制發(fā)酵期間堆肥中的嗜熱細菌和霉菌進行了分離鑒定，并進行了菌株的代謝能力和培養(yǎng)方法的研究，旨在為下一步制備蘆筍老莖堆料發(fā)酵菌劑以及調(diào)控堆肥過程提供理論依據(jù)。
　　 本實驗

2、采用稀釋涂布法對蘆筍老莖堆肥不同發(fā)酵階段的6個樣品中的嗜熱可培細菌和霉菌進行了分離，共分離到菌落形態(tài)有明顯區(qū)別的細菌菌株22個，霉菌菌株27個。根據(jù)16SrDNA序列分析結(jié)果，22株細菌菌株中13株屬于芽孢桿菌屬（Bacillus），4株屬于假黃色單胞菌屬（Pseudoxanthomonas），1株屬于類芽孢桿菌屬（Paenibacillus），1株屬于腸桿菌屬（Enterobacter），1株屬于短芽孢桿菌屬（Brevibacillu

3、s），1株屬于副球菌屬（Paracoccus），菌株D-b2在GenBank數(shù)據(jù)庫中的分類地位待定。根據(jù)菌落形態(tài)和個體形態(tài)特征觀察結(jié)果，初步確定27株霉菌中20株屬于青霉(Penicilliumspp.)，2株屬于長梗串孢霉(Monilochaetesspp.)，2株屬于鏈格孢霉（Alternariaspp.），1株屬于擬青霉（Paecilomycessp.），1株屬于毛霉(Mucorsp.)，1株為曲霉（Aspergillussp.）

4、。從以上結(jié)果可以看出，蘆筍老莖堆肥中的優(yōu)勢嗜熱細菌主要是芽孢桿菌(Bacillusspp.)和假黃色單胞菌(Pseudoxanthomonasspp.)，嗜熱霉菌主要是青霉（Penicilliumspp.）。
　　 實驗采用剛果紅染色鑒定法和濾紙條培養(yǎng)法篩選蘆筍老莖堆肥樣品中可以產(chǎn)纖維素酶的嗜熱菌株，經(jīng)過初篩得到3株細菌和2株霉菌，細菌均屬芽孢桿菌屬，霉菌1株屬于青霉1株屬于曲霉。選擇其中(D/d)2較大的細菌菌株D-b1和曲霉

5、f-24，利用液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基發(fā)酵研究了培養(yǎng)基初始pH值、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間對它們產(chǎn)生纖維素酶的影響。結(jié)果芽孢桿菌D-b1在培養(yǎng)基初始pH值為6、培養(yǎng)溫度為45℃條件發(fā)酵兩天時具有最高的產(chǎn)酶活性22.01U/mL。曲霉f-24在培養(yǎng)基初始pH值5、培養(yǎng)溫度50℃條件發(fā)酵五天時產(chǎn)酶最高達63.93U/mL。
　　 本實驗采用苯胺藍平板褪色法初步從蘆筍老莖堆肥樣品中篩選出具有木質(zhì)素降解能力的嗜熱細菌9株，其中7株屬于芽孢桿菌屬，1株屬