2-丙基-2-戊烯酸RP-HPLC分析方法的建立與丙戊酸鈉合理用藥分析.pdf

1、目的：丙戊酸鈉（Sodium Valproate,VPA）是廣譜抗癲癇藥，臨床應(yīng)用廣泛。為了探討VPA代謝產(chǎn)物2-丙基-2-戊烯酸(2-Propyl-2-pentenoic Acid,2-ene-VPA)對(duì) VPA療效及不良反應(yīng)的影響，擬建立2-ene-VPA血藥濃度分析方法，分析VPA與2-ene-VPA血藥濃度之間，VPA和2-ene-VPA血藥濃度與患者肝、腎功能的關(guān)系，以及左乙拉西坦（Levetiracetam，LEV）對(duì)VPA

2、及2-ene-VPA濃度的影響，為VPA的合理用藥提供參考。
　　方法：
　?、挪捎梅聪喔咝б合嗌V法（RP-HPLC）測(cè)定兒童癲癇患兒丙戊酸鈉代謝產(chǎn)物2-ene-VPA的血藥濃度。血漿用乙酸乙酯提取，以2,4'-二溴苯乙酮作為內(nèi)標(biāo)，氮?dú)鈸]干樣品，色譜柱：ZORBAX SB-C18柱（4.6mm?150mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-水（55:45）；檢測(cè)波長(zhǎng)：217nm；流速：1.0mL·min-1；柱溫：35℃；進(jìn)樣溫度：

3、20℃。
　?、聘鶕?jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，記錄患兒人口學(xué)信息，服用VPA劑量及合并用藥情況，收集測(cè)定VPA濃度后的廢棄血，采集患者肝腎功能檢查指標(biāo)；
　　⑶統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：計(jì)量資料用x?s表示，運(yùn)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)VPA給藥劑量與VPA及2-ene-VPA血藥濃度之間的關(guān)系，VPA血藥濃度與2-ene-VPA血藥濃度之間的關(guān)系，癲癇患兒肝、腎功能等生化指標(biāo)與VPA及2-ene-VPA血藥濃度之間的關(guān)系進(jìn)行相關(guān)性分析，探討年齡

4、及性別、LEV對(duì)VPA及2-ene-VPA血藥濃度的影響；
　　⑷納入年齡0～17歲的癲癇患兒344例，男性癲癇患兒222例，女性122例，平均年齡(7.29±4.3)歲，VPA服藥劑量(17.76±6.19)mg/kg,單用 VPA的患者252例，平均服藥劑量(17.78±5.42)mg/kg，合并用藥92例。
　　結(jié)果：
　?、?-ene-VPA的RP-HPLC分析方法：內(nèi)標(biāo)2,4'-二溴苯乙酮和2-ene-VPA

5、的保留時(shí)間分別為11.2min和5.2min，2-ene-VPA的血漿濃度在0.5～16.0μg?mL-1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，2-ene-VPA與內(nèi)標(biāo)2,4'-二溴苯乙酮的峰面積比與血藥濃度呈良好的線性關(guān)系（R>0.999）,平均回收率為(96.85±0.33％)，日內(nèi)RSD<5%，日間RSD<5%；
　?、芕PA濃度、2-ene-VPA度與VPA給藥劑量、肝腎功能之間的關(guān)系：①VPA給藥劑量與VPA血藥濃度具有相關(guān)性（P<0.

6、01,相關(guān)系數(shù)R=0.472），②VPA給藥劑量與2-ene-VPA血藥濃度無(wú)線性關(guān)系(P=0.453,相關(guān)系數(shù) R=0.047)，③VPA濃度與2-ene-VPA濃度無(wú)線性關(guān)系，（P=0.177，相關(guān)系數(shù)R=0.085），④VPA血藥濃度與CREA（P=0.001,R=0.207）及ALB（P=0.041,R=-0.129）具有相關(guān)性，與其他生化指標(biāo)ALT、TBIL、DBIL、IBIL、TP、GLB、BUN、Cys C無(wú)相關(guān)關(guān)系（P>

7、0.05),⑤2-ene-VPA血藥濃度與TP（P=0.012,R=-0.158）及GLB（P=0.018,R=-0.149）具有相關(guān)性，與其他生化指標(biāo)ALT、ALB、TBIL、DBIL、IBIL、BUN、CREA、Cys C無(wú)相關(guān)性（P>0.05);
　?、悄挲g對(duì)VPA及2-ene-VPA血藥濃度的影響：經(jīng)方差SNK法分析，①0～5歲組的VPA濃度為（50.62±20.04)μg·mL-1與②6～11歲組的VPA濃度（66.36

8、±25.73)μg· mL-1、③12～17歲組 VPA的濃度(61.04±24.84)μg·mL-1相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；②VPA濃度的平均血藥濃度6~11歲組與③12～17歲組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；①0～5歲組的2-ene-VPA濃度為(3.93±1.57)μg·mL-1，②6～11歲組的2-ene-VPA濃度為(3.46±1.40)μg·mL-1，③12～17歲組的2-ene-VPA濃度為(3

9、.76±1.52)μg·mL-1，這三組間的2-ene-VPA濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.550，P=0.080)；⑷性別對(duì)VPA及2-ene-VPA血藥濃度的影響：?jiǎn)为?dú)服用VPA的252例癲癇患兒中，男性160例(VPA劑量18.18±5.34)mg/kg，女性92例(VPA劑量17.08±5.52)mg/kg，二組間服藥劑量的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.120），癲癇患兒VPA血藥濃度男性(57.79±24.34μg·mL-1）與女

10、性(55.76±26.63μg·mL-1)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.539），癲癇患兒的2-ene-VPA血藥濃度男性為(3.59±1.42μg·mL-1)與女性(4.59±1.64μg·mL-1)相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.021）；
　?、蒐EV對(duì)VPA及2-ene-VPA濃度的影響：①VPA組(VPA濃度57.05±25.17μg·mL-1)與LEV組(VPA濃度為70.72±30.55μg·mL-1)，VPA濃度差異

11、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P=0.001；②VPA用藥組的2-ene-VPA濃度(3.76±1.52)μg·mL-1,與合并用藥 LEV組的2-ene-VPA濃度(3.78±1.63)μg·mL-1,兩組間的2-ene-VPA濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P=0.940。
　　結(jié)論：
　　⑴本課題建立的測(cè)定2-ene-VPA血藥濃度的RP-HPLC分析方法簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、快速，可用于臨床上癲癇患者2-ene-VPA血藥濃度的分析測(cè)定。
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