AnxB9基因敲減聯(lián)合規(guī)律運(yùn)動(dòng)對(duì)增齡果蠅心臟功能的影響.pdf

1、1.研究目的：
　　通過對(duì)模式生物果蠅實(shí)施AnxB9基因敲減聯(lián)合規(guī)律運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練干預(yù)，檢測(cè)心臟功能、運(yùn)動(dòng)能力和壽命變化情況的研究，探討AnxB9基因表達(dá)下調(diào)對(duì)心臟功能的影響機(jī)制、AnxB9基因表達(dá)下調(diào)運(yùn)動(dòng)心臟的適應(yīng)變化、運(yùn)動(dòng)抗衰老功能和中老齡期參與運(yùn)動(dòng)對(duì)心臟功能的影響，為AnxB9基因功能的后續(xù)研究和不同時(shí)段運(yùn)動(dòng)效果的后續(xù)研究提供參考依據(jù)。
　　2.研究方法：
　　將AnxB9品系雌蠅(w[1118];P{GD11750}

2、v27493)分別與野生系w1118雄蠅和arm-Gal4雄蠅雜交，取F1代，分為對(duì)照組和敲減組，又分別將對(duì)照組和敲減組各分為安靜-對(duì)照組、長訓(xùn)-對(duì)照組、晚訓(xùn)-對(duì)照組和安靜-敲減組、長訓(xùn)-敲減組、晚訓(xùn)-敲減組。每組收集處女蠅300只以上，恒溫(25℃左右)，恒濕（50％左右），12小時(shí)晝/夜循環(huán)交替光照飼養(yǎng)。根據(jù)運(yùn)動(dòng)方案，采用果蠅運(yùn)動(dòng)裝置實(shí)施運(yùn)動(dòng)干預(yù)，運(yùn)動(dòng)負(fù)荷恒定不變，0.2 r/s，5天/周，2.5h/天，方案結(jié)束24h后取材。指標(biāo)檢

3、測(cè):通過qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)對(duì)照組和敲減組AnxB9基因mRNA表達(dá)水平;于第43天各組隨機(jī)取40只果蠅，采用M-mode心動(dòng)圖檢測(cè)果蠅心臟功能;各組隨機(jī)取100只果蠅檢測(cè)果蠅運(yùn)動(dòng)能力;各組隨機(jī)取120只果蠅統(tǒng)計(jì)生命周期。
　　3.研究結(jié)果：
　　3.1.果蠅AnxB9基因mRNA表達(dá)量檢測(cè)結(jié)果
　　結(jié)果顯示，敲減組果蠅AnxB9表達(dá)量相對(duì)于對(duì)照組有29％的下降，具有非常顯著性差異(P＜0.01)。
　　3.2

4、.果蠅心臟功能M-mode心動(dòng)圖檢測(cè)結(jié)果
　　HP、DI、FS、CI的雙因素方差分析結(jié)果顯示均存在顯著的交互效果(P＜0.05);SI顯示無交互作用(P＞0.05)，無主效應(yīng)(P＞0.05)。
　　HP和DI分析結(jié)果顯示，在對(duì)照組內(nèi)，長訓(xùn)-對(duì)照組顯著高于安靜-對(duì)照組(P＜0.05);在敲減組內(nèi)，各組無顯著差異(P＞0.05)。在對(duì)照組與敲減組間，安靜-敲減組顯著高于安靜-對(duì)照組(P＜0.01);在晚訓(xùn)-敲減組極顯著高于晚訓(xùn)-

5、對(duì)照組(P＜0.01)。
　　對(duì)心臟停搏、延長收縮和舒張功能不全各指標(biāo)統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示心臟停搏發(fā)生率晚訓(xùn)-敲減組(65.4％)和安靜-敲減組(47.6％)明顯高于其他各組。舒張功能不全發(fā)生率相對(duì)較高的是晚訓(xùn)-對(duì)照組(74.2％)和安靜-對(duì)照組(74.1％)，其后是安靜-敲減組(61.9％)和晚訓(xùn)-敲減組(57.7％)，而長訓(xùn)-敲減組(6.1％，0％，33.3％)各項(xiàng)發(fā)生率均低于其它各組(見表3-2)，且在同一種運(yùn)動(dòng)干預(yù)方案下，敲

6、低組舒張功能不全發(fā)生率均低于對(duì)照組。
　　FS分析結(jié)果顯示，在對(duì)照組內(nèi)，長訓(xùn)-對(duì)照組顯著高于安靜-對(duì)照組(P＜0.05);敲減組內(nèi)的各組對(duì)比均無顯著差異(P＞0.05)。在對(duì)照組與敲減組之間，安靜-敲減組明顯高于安靜-對(duì)照組(P＜0.01);其它均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　3.3.運(yùn)動(dòng)能力檢測(cè)分析結(jié)果
　　CI攀爬能力分析結(jié)果顯示，在對(duì)照組內(nèi)，長訓(xùn)-對(duì)照組顯著高于安靜-對(duì)照組(P＜0.01)和晚訓(xùn)-對(duì)照組(P

7、＜0.01);在敲減組內(nèi)，安靜-敲減組和長訓(xùn)-敲減組均顯著高于晚訓(xùn)-敲減組(P＜0.01，P＜0.01)。在對(duì)照組與敲減組之間，安靜-敲減組顯著高于安靜-對(duì)照組(P＜0.01)。
　　3.4.生命周期檢測(cè)分析結(jié)果
　　在安靜、長訓(xùn)、晚訓(xùn)條件下，敲減組平均生存期均高于對(duì)照組。在基因正常表達(dá)或基因表達(dá)下調(diào)條件下，長訓(xùn)組和晚訓(xùn)組平均生存期均高于安靜組。
　　4.結(jié)論：
　　4.1.AnxB9基因敲減或長期規(guī)律運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練單

8、一實(shí)施時(shí)，可增加果蠅心臟功能中的舒張間期和心動(dòng)周期,提高果蠅的縮短分?jǐn)?shù)。AnxB9基因敲減聯(lián)合長期規(guī)律運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練能夠改善果蠅的心跳節(jié)律不齊。
　　4.2.在AnxB9基因不敲減的情況下，長期規(guī)律運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可明顯提高果蠅的運(yùn)動(dòng)能力。在AnxB9基因敲減情況下，中老齡期進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練會(huì)造成果蠅運(yùn)動(dòng)能力明顯下降。另外，在不參與規(guī)律運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練干預(yù)的條件下，AnxB9基因敲減能夠提高果蠅的運(yùn)動(dòng)能力。
　　4.3.AnxB9基因敲減或參與規(guī)律運(yùn)