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文檔簡介
1、背景及目的:Bonfini等人在果蠅眼發(fā)育的研究中發(fā)現(xiàn)了Sos蛋白,認為其能夠在不同的細胞過程中發(fā)揮作用,其種系突變誘導了各種進展性疾病和功能紊亂。Ras是來自G蛋白家族的小單體蛋白質(zhì),可與GTP結(jié)合。具有活性的Ras蛋白對細胞生長和分化具有重要的作用,Ras信號通路參與惡性轉(zhuǎn)化的異常調(diào)節(jié)。Ras的活化型可激活RAF1/促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)/細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)信號通路,這對于細胞分化、轉(zhuǎn)化、存活和遷移具有決定性作用
2、。本實驗研究 Ras及Sos1蛋白在上皮性卵巢癌組織中的表達,分析這些表達與上皮性卵巢癌手術-病理分期、病理分級、手術滿意度(殘留病灶直徑是否小于1cm)、患者無瘤生存時間等相關性,對進一步探討Ras/Sos1蛋白及其信號通路在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用奠定理論基礎,為卵巢癌診斷和預后評估提供參考。
方法:(1)搜集標本及相關資料,包括手術切除上皮性卵巢癌標本和手術切除交界性上皮性卵巢腫瘤、卵巢上皮性囊腺瘤、正常卵巢組織對照標本;
3、同時搜集患者的年齡、初診日期、手術-病理分期與病理分級、手術滿意度等臨床相關資料及隨訪情況等。(2)免疫組織化學實驗,分別以Ras/ Sos1蛋白為一抗,采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連接法在上皮性卵巢癌與其它卵巢組織中進行免疫組織化學實驗。(3)實驗結(jié)果分析,在顯微鏡下定性觀察兩種蛋白在細胞膜與細胞漿的表達強度,記錄包括陰性、弱陽性(+),陽性(++)和強陽性(+++),計算其陽性率;光密度測定,將所有上皮性卵巢癌病例免疫組化標本
4、,進行攝片,以圖像分析軟件ipwin32,進行光密度測定。(4)統(tǒng)計學處理,采用x2檢驗對兩種蛋白在上皮性卵巢癌及它卵巢組織中表達的陽性率進行顯著性檢驗;采用SPSS19.0軟件,將Sos1/Ras蛋白在卵巢癌中表達的光密度值,按年齡、病理類型、手術-病理分期、病理分級、手術滿意度(殘留病灶直徑是否小于1cm)進行相關性(r)分析;同時分析兩種蛋白不同表達強度的晚期患者(Ⅲ-Ⅳ期)之間無瘤生存時間的差異。設檢驗水準為0.05,P<0.0
5、5為差異有統(tǒng)計學意義。
結(jié)果:共觀察上皮性卵巢癌病例62例,平均年齡50.47±9.77;手術-病理分期Ⅰ期患者6例,Ⅱ期5例,Ⅲ期54例,Ⅳ期4例;病理分級低分化、中等分化、高分化分別為36例、11例和10例;行滿意的腫瘤細胞減滅術(術后殘余病灶直徑小于1cm)36例和非滿意的腫瘤細胞減滅術(術后肉眼所見殘留病灶大于或等于1cm)26例;無瘤生存時間最長141月,最短2月。另搜集交界性上皮性卵巢腫瘤標本5份,卵巢上皮性囊腺瘤
6、15份、正常卵巢組織標本18份。
Sos1蛋白在上皮性卵巢癌、交界性腫瘤、上皮性囊腺瘤、正常卵巢組織中的表達陽性率分別為82.26%、60.00%、66.67%、33.33%,上皮性卵巢癌與正常卵巢組織的陽性率的差異有統(tǒng)計學意義(x2=14.00>7.88,p<0.005),其余陽性率差異無統(tǒng)計學意義(x2<3.84,P>0.05)。上皮性卵巢癌表達的陽性者中,均出現(xiàn)了弱陽性(54.71%)、中度陽性(23.53%)和強陽性(
7、11.76%),其他幾種類型的卵巢組織僅有弱陽性(66.67%-80.00%)和中度陽性(20.00%-33.33%)表達。
Ras蛋白在上皮性卵巢癌、交界性腫瘤、上皮性囊腺瘤、正常卵巢組織中的表達陽性率分別為90.32%、80.00%、53.33%、44.44%。上皮性卵巢癌與上皮性囊腺瘤和正常卵巢組織的陽性率差異有統(tǒng)計學意義(x2=9.32、15.60>7.88,p<0.005),其余陽性率之間均無統(tǒng)計學意義(x2<3.8
8、4,P>0.05)。上皮性卵巢癌均出現(xiàn)了弱陽性(53.57%)、中度陽性(33.93%)和強陽性(12.50%),其他卵巢組織僅有弱(陽性50.00%-81.50%)和中度陽性(12.50%-50.00%)反應。
Ras和Sos1蛋白在上皮性卵巢癌細胞中表達的陽性率均以細胞膜和細胞漿同時存在(82.26%和71.19%)為主,僅表達于細胞膜(6.84%和3.23%)或細胞漿(6.45%和1.61%)的陽性率很低(p<0.005
9、)。
Sos1蛋白在各種病例分組中表達的光密度均無相關性(r=-0.10-0.99,P>0.05)。Ras蛋白在不同病理類型病例表達的光密度具有相關性,漿液性囊腺癌中的表達較其他上皮性卵巢癌病理類型更為顯著(r=0.26,p=0.04);Ⅲ-Ⅳ期低分化腺癌及漿液性囊腺癌患者無瘤生存時間的長短與Ras蛋白表達的光密度存在相關性(p=0.04),其他病例分組Ras表達的光密度均無相關性(P>0.05)。
結(jié)論:研究結(jié)果顯
10、示,Sos1、Ras蛋白在上皮性卵巢癌中表達的陽性率高于正常卵巢和良性卵巢腫瘤組織,且大部分以細胞漿和細胞膜同時表達為主,表明這兩種蛋白與上皮性卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展可能存在內(nèi)在聯(lián)系。統(tǒng)計學分析顯示,Ras蛋白在漿液性上皮性卵巢癌的表達比在其他病理類型的表達更為顯著,提示它的表達存在組織類型的差異,這個特點可用來支持卵巢漿液性腺癌的特異性診斷;同時統(tǒng)計學分析也提示兩種蛋白的表達程度與上皮性卵巢癌患者年齡、手術病理分期、病理分級、手術滿意度這
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