電針對ApoE---小鼠主動脈竇基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)表達的影響.pdf

1、目的:
　　探討ApoE-/-小鼠主動脈竇基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)表達;進一步闡明電針干預動脈粥樣硬化(As)作用可能機制。
　　方法:
　　將38只6周齡ApoE-/-小鼠隨機分成兩組:①高脂高膽固醇飲食組34只，給予高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)。飼料配方比例為含21％脂肪、1.25％膽固醇等。②中等脂肪飲食組(MF組)4只，給予含10％脂肪的飼料喂養(yǎng)。喂食高脂飼料14周后，從高脂高膽固醇飲食組隨機選擇4只作為高脂高膽固

2、醇飲食組，高脂高膽固醇飲食組和中等脂肪飲食組小鼠被全部處死，采集血漿，取ApoE-/-小鼠主動脈竇，常規(guī)HE染色、冰凍HE染色以及油紅O染色，在光鏡下觀察。據(jù)此判斷動脈粥樣硬化造模是否復制成功。
　　同時，分別觀察比較不同配方高中等脂肪飲食飼料喂養(yǎng)后ApoE-/-小鼠的Lee's指數(shù)、肝體比、體脂比以及主動脈竇病理的變化。隨機將其余30只高脂高膽固醇飲食組ApoE-/-小鼠分為藥物對照組、電針治療組、模型對照組，每組10只。模型組

3、每日雙蒸水0.1ml/10g灌胃，并隔日于自制束鼠器上固定10min;藥物對照組給予辛伐他汀，灌胃治療，劑量為40mg/kg.d，電針治療組給予針刺ApoE-/-小鼠內(nèi)關(guān)、后足三里、后三陰交、神門穴治療。電針治療組和藥物對照組分別給予相應(yīng)治療11周后，取ApoE-/-小鼠主動脈竇，行HE染色觀察各組小鼠主動脈竇斑塊的病理組織學改變，應(yīng)用免疫組化染色法檢測各組ApoE-/-小鼠主動脈竇斑塊組織MMP-9的蛋白表達。
　　結(jié)果:

4、>　　(1)各組Lee's指數(shù)比較:電針組與模型組、藥物組相比，P＜0.05;各組體脂比比較:電針組與模型組、藥物組相比，P＜0.05。說明電針組的肝臟脂肪含量較少，電針組周身脂肪含量較模型組、藥物組少;
　　(2)各組ApoE-/-小鼠主動脈竇HE染色病理結(jié)果提示:模型組主動脈竇內(nèi)膜下斑塊內(nèi)有許多脂質(zhì)堆積和膽固醇結(jié)晶體，斑塊鈣化區(qū)明顯增厚;中層管壁內(nèi)彈力纖維消失;主動脈瓣增厚，瓣膜接和緣（Arantius結(jié)節(jié)）出現(xiàn)大量泡沫細胞和

5、脂核。藥物組主動脈竇內(nèi)膜下斑塊鈣化區(qū)增厚明顯，有少許壞死核，并有大量脂質(zhì)沉積和膽固醇結(jié)晶體;中層管壁部分內(nèi)彈力纖維消失;部分主動脈瓣增厚;存在主動脈瘤。針刺組主動脈竇局部內(nèi)膜下斑塊增厚，部分主動脈瓣增厚，并可見少量泡沫細胞，斑塊內(nèi)有少量膽固醇結(jié)晶體和脂質(zhì)沉積;。
　　(3)各組主動脈竇MMP-9免疫組化染色切片可見:模型組主動脈竇內(nèi)膜斑塊中出現(xiàn)大量的細胞壞死和凋亡，纖維帽上大量表達MMP-9陽性棕褐色顆粒。MMP-9同時在中膜及外

6、膜也有表達，但主要集中在內(nèi)膜及內(nèi)膜下更明顯，與AS斑塊形成部位相一致。說明斑塊的發(fā)展及穩(wěn)定性與MMP-9有著密切關(guān)系。
　　藥物組主動脈竇內(nèi)膜的纖維帽上MMP-9的蛋白表達顯示，與模型組比較陽性棕褐色顆粒減少，表明主動脈竇斑塊纖維帽中間質(zhì)細胞和內(nèi)皮細胞含量較多，說明藥物干預后主動脈竇的斑塊處于相對穩(wěn)定狀態(tài)。
　　電針組MMP-9蛋白的陽性棕褐色顆粒較高脂組相比明顯減少，且壞死細胞及膽固醇結(jié)晶也相對減少?？芍?，針刺可減緩平滑肌