針灸對(duì)CTX化療小鼠骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、　　目的 通過(guò)觀察針灸對(duì)CTX骨髓抑制小鼠骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2、MMP-9表達(dá)的調(diào)節(jié),探討針灸對(duì)CTX化療小鼠骨髓造血微環(huán)境的影響,以揭示針灸改善化療后骨髓抑制,促進(jìn)造血功能的恢復(fù),升高外周血白細(xì)胞的作用機(jī)制。
　　方法 將體重為 22±2g(KM)小鼠,稱量后依據(jù)體重隨機(jī)分為正常組、模型組、針刺組和艾灸組4組。正常組小鼠按照0.02ml/g用藥量腹腔注射0.9%的生理鹽水,剩余 3組小鼠則按照 100mg/kg

2、/d 用藥量,腹腔注射 CTX溶液(按照小鼠體重 0.02ml/g 用藥量,濃度為 5mg/ml),停藥后 4h 模型即成。在造模后 4h,針刺組、艾灸組小鼠分別選取“大椎”、“膈俞”、“腎俞”、“足三里”給予針刺和艾灸治療,正常組和模型組則陪同固定,每天在相同時(shí)間內(nèi)治療。同時(shí)分別在造模前、造模后及治療 3 天后、5 天后割尾靜脈取血,檢測(cè)外周血白細(xì)胞數(shù)量；此外,在治療 3 天、5 天后,分別處死一批小鼠,取出股骨,用免疫組織化學(xué)法觀察

3、骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2、MMP-9的表達(dá)。數(shù)據(jù)分析采用SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計(jì)分析軟件。
　　結(jié)果 1 腹腔注射CTX后小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)量降低,而針刺和艾灸能夠使降低的白細(xì)胞數(shù)量升高。造模后,與正常組相比,模型組、針刺組和艾灸組小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)量均降低,有顯著性差異(P<0.05),說(shuō)明模型成功；治療3天后,與正常組相比,其余三組小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)量仍較低,有顯著差異(P<0.05)；與模型

4、組相比,針刺組、艾灸組稍有升高,但無(wú)顯著性差異(P>0.05),針刺組稍高于艾灸組,但無(wú)顯著性差異(P>0.05)；治療5天后針刺組、艾灸組小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)量持續(xù)上升,針刺組高于正常組、模型組,有顯著差異(P<0.05),艾灸組也升高,但與針刺組相比,無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　2 治療3天后,與正常組比較,模型組、針刺組、艾灸組骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-2 蛋白表達(dá)均降低,有顯著性差異(P<0.05)；與模

5、型組比,針刺組、艾灸組小鼠骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-2 蛋白表達(dá)均有所上升,有顯著差異(P<0.05)；與針刺組比,艾灸組稍高于針刺組,無(wú)顯著性差異(P>0.05)；治療 5 天后,模型組、針刺組和艾灸組 MMP-2 蛋白表達(dá)均有所升高,但仍低于正常組,且有顯著性差異(P<0.05)；與模型組相比,針刺組和艾灸組MMP-2蛋白表達(dá)仍較強(qiáng),均有顯著性差異(P<0.05)；與針刺組相比,艾灸組略高于針刺組,但無(wú)顯著性差異(P>0.0

6、5)。
　　3 治療3天后,與正常組比較,模型組、針刺組、艾灸組小鼠骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-9 蛋白表達(dá)均降低,有顯著性差異(P<0.05)；與模型組比,針刺組、艾灸組小鼠骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-9 蛋白表達(dá)均有所上升,有顯著性差異(P<0.05)；與針刺組比,艾灸組高于針刺組,有顯著性差異(P<0.05)；治療 5 天后,模型組、針刺組和艾灸組 MMP-9 蛋白表達(dá)均持續(xù)增強(qiáng),但仍低于正常組,且有顯著性差

7、異(P<0.05)；與模型組相比,針刺組和艾灸組MMP-2蛋白表達(dá)較強(qiáng),有顯著性差異(P<0.05)；艾灸組仍高于針刺組,有顯著性差異(P<0.05)。
　　結(jié)論 1 CTX腹腔注射后可造成KM小鼠骨髓抑制,外周血白細(xì)胞減少。針灸可以改善化療后造血微環(huán)境的損傷,促進(jìn)骨髓造血功能的恢復(fù),增加外周血白細(xì)胞數(shù)量,并且其作用隨著治療次數(shù)的增加呈現(xiàn)一定的規(guī)律性。結(jié)合前期導(dǎo)師組的研究成果,針灸能夠提升外周血白細(xì)胞數(shù)量,療效是確切的。 <

8、br>　　2 CTX腹腔注射可以使KM小鼠骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2蛋白表達(dá)下降,針刺、艾灸可以增強(qiáng) CTX 化療小鼠骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-2蛋白表達(dá),使集落刺激因子、細(xì)胞因子可能通過(guò)明膠酶的途徑動(dòng)員造血干細(xì)胞從骨髓到外周血,進(jìn)而提升外周血白細(xì)胞。
　　3 CTX腹腔注射可以使 KM小鼠骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-9蛋白表達(dá)下降,針刺、艾灸能夠增強(qiáng)CTX小鼠骨髓組織中基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9蛋白表達(dá)。