豬源甲型H1N1流感病毒的進(jìn)化樹分析及其在豚鼠間氣源性傳播的研究.pdf

1、2009年4月豬源新型甲型H1N1流感病毒(swine-origin2009 A(H1N1)influenza viruses，2009(H1N1)Ⅳ)首先在墨西哥和美國出現(xiàn)，并迅速在人群中傳播，對公共衛(wèi)生形成巨大威脅。2009(H1N1)Ⅳ是一個(gè)三源重組病毒，基因片段來源于不同的流感病毒，PB2，PA基因來源于禽流感，PB1來源于人流感，HA，NP，NS來源于經(jīng)典豬流感病毒，NA，M來源于禽源豬流感，與季節(jié)性流感病毒相比，人體對其抗原

2、性缺乏免疫力，因而迅速在全球范圍內(nèi)流行。
　　 盡管造成2009(H1N1)Ⅳ大規(guī)模流行的因素復(fù)雜，但是2009(H1N1)Ⅳ具備氣源性傳播特征是該疫情大流行的主要原因。病毒一旦形成氣溶膠便會(huì)借助大氣流造成大面積迅速擴(kuò)散。然而，該亞型病毒氣溶膠的發(fā)生、傳播及其感染機(jī)制知之甚少，并且對它的氣源性傳染還存在一些爭議。2011年初，山東地區(qū)的部分豬場出現(xiàn)了新型甲型H1N1流感的疫情。因此，本研究以豬源新型甲型H1N1流感病毒山東分離株

3、為研究對象，首先分析其八個(gè)片段的分子進(jìn)化特點(diǎn)，旨在確定其遺傳學(xué)地位;然后以豚鼠為動(dòng)物模型深入了解其在哺乳動(dòng)物間通過空氣傳播的規(guī)律，目的是為有效防控新型甲型H1N1流感病毒在人際的傳播提供理論依據(jù)。
　　 首先，我們對疑似病死豬進(jìn)行病料采集以及病毒的分離鑒定;然后在序列測定的基礎(chǔ)上，利用MEGA軟件分析該分離病毒株(A/swine/Shandong/07/2011)的HA，NA，PB2，PB1，PA，NP，NS和M8個(gè)基因片段與其

4、它已公布序列的2009(H1N1)Ⅳ及其他相關(guān)流感病毒之間的進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，該株病毒八個(gè)片段的核酸序列與2009(H1N1)Ⅳ對應(yīng)序列的同源性都大于99％，并且該毒株HA蛋白的裂解位點(diǎn)和優(yōu)先識(shí)別唾液酸α-2，6受體的位點(diǎn)與2009(H1N1)Ⅳ也高度一致，分別為PSIQSR↓ GLFGAI和190D、225 D。但是，與2009(H1N1)Ⅳ毒株的HA蛋白相比，A/swine/Shandong/07/2011 HA蛋白受體結(jié)

5、合位點(diǎn)處出現(xiàn)了重要的突變(Q226R)。然后，我們建立豚鼠的氣溶膠傳染模型，驗(yàn)證2009(H1N1)Ⅳ形成氣溶膠及其氣源性傳染的特點(diǎn)。在該傳染模型中，A/swine/Shandong/07/2011能夠造成氣溶膠感染組實(shí)驗(yàn)豚鼠的感染，但感染率比直接接觸組低。
　　 本研究不僅為進(jìn)一步研究2009(H1N1)Ⅳ的分子進(jìn)化提供了重要信息;而且還證明了A/swine/Shandong/07/2011株具有形成病毒氣溶膠的能力，在實(shí)驗(yàn)條