豬源和人源2009-H1N1流感病毒毒力比較研究.pdf

1、第1株2009/H1N1大流行流感病毒在2009年4月被分離出來后，關于2009/H1N1流感病毒由人向豬傳播的報道越來越多。在豬流感流行病學調查中，本實驗室從豬群中分離到4株2009/H1N1流感病毒。為了進一步研究這些病毒對哺乳動物的致病性，我們分別評價了從豬體內分離到的2009/H1N1流感病毒(p-H1N1)、從人體內分離到的2009/H1N1流感病毒(h-H1N1)對小鼠模型的致病性。結果顯示，兩株p-H1N1病毒A/swin

2、e/Nanchang/3/2010和A/swine/Nanchang/F9/2010(H1N1)在小鼠肺臟中復制能力更強，有兩株病毒甚至能導致小鼠大量死亡。組織病理學檢測發(fā)現(xiàn)，感染p-H1N1的小鼠肺臟出現(xiàn)不同程度的病理損傷，有中度甚至嚴重的細支氣管炎，偶爾伴隨有細支氣管上皮組織細胞的壞死，并有輕微的肺泡炎。對感染小鼠的肺臟細胞因子檢測發(fā)現(xiàn)，p-H1N1能夠更顯著地誘導炎癥因子表達，而檢測到的抗炎因子和抗病毒因子表達較低。為了找到病毒與

3、BALB/C小鼠致病性之間的關系，本研究比較了p-H1N1，h-H1N1和經典的H1N1亞型SIV(c-H1N1)在氨基酸水平上的差異，并在HA，PA，PB2和NS1蛋白上發(fā)現(xiàn)了6個共同的氨基酸位點突變：HA：E103D、P145S；NS1：V123I；PB2：I588T；PA：V70A、E547D?？傊?，這些研究表明與h-H1N1相比，p-H1N1感染小鼠模型后表現(xiàn)為毒力增強。
　　 鑒于2009/H1N1流感病毒是從豬體內分

4、離到的，通過比較p-H1N1與c-H1N1對BALB/C小鼠的致病性差異、在豬肺泡巨噬細胞(PAM)上的增殖差異以及檢測感染PAM細胞后炎癥細胞因子、凋亡相關因子、細胞黏附相關分子和抗病毒細胞因子表達水平的變化。結果發(fā)現(xiàn)與c-H1N1相比，p-H1N1能夠顯著降低小鼠體重，在PAM細胞上增殖能力更強。PAM上細胞因子檢測發(fā)現(xiàn)，感染后3h和6h，二者誘導產生的炎癥因子如白介素類細胞因子，無顯著差異。感染后12h，c-H1N1對所有細胞因子