亞臨界萃取梔子功能成分及活性研究.pdf

1、本文以DPPH自由基清除能力為評價(jià)指標(biāo)，對脫脂梔子果仁中功能成分的提取方法進(jìn)行篩選，并對亞臨界提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。運(yùn)用分極相萃取法對亞臨界梔子粗提物進(jìn)行萃取分析，并研究其生物活性。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)脫脂梔子果仁中抗氧化成分提取方法的篩選
　　以DPPH自由基清除能力為評價(jià)指標(biāo)，比較回流、超聲、微波和亞臨界四種提取方法對梔子提取物抗氧化活性的影響，同時(shí)對其進(jìn)行成分分析及乙酰膽堿酯酶活性抑制性研究。結(jié)果表明:梔子的亞臨

2、界乙醇提取物中總環(huán)烯醚萜類物質(zhì)含量為68.86％;DPPH自由基清除能力的IC50值為193.90μg/mL;在濃度為5.0 mg/mL時(shí)，對乙酰膽堿酯酶的抑制率為70.39％。亞臨界乙醇提取方法優(yōu)于另外三種方法。
　　(2)梔子亞臨界提取工藝條件優(yōu)化
　　選取萃取溫度、萃取時(shí)間、乙醇濃度三個(gè)因素，以DPPH自由基清除能力為響應(yīng)值，進(jìn)行三因素三水平實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化梔子亞臨界乙醇提取工藝。最佳工藝條件為:提取溫度140℃，萃取時(shí)間9

3、 min，乙醇體積濃度60％。在此工藝條件下得到梔子提取物對DPPH自由基的清除能力達(dá)最大值90.01％。與理論預(yù)測值基本相符。
　　(3)梔子提取物的分離及成分分析
　　利用最佳提取工藝條件獲得梔子提取物，并用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)一步萃取，得各極相萃取物。采用比色法、HPLC法進(jìn)行成分分析，采用DPPH法評價(jià)抗氧化活性，采用Ellman's法測定對乙酰膽堿酯酶的抑制作用，利用MTT檢測對PC12細(xì)胞的作用。研究結(jié)果表

4、明:各極相梔子提取物的主要成分為環(huán)烯醚萜類，其中乙酸乙酯相中含量最高，為80.95％; HPLC結(jié)果顯示，京尼平苷在正丁醇相中含量最高，為206.31 mg/g，其次為乙酸乙酯相，含量為196.09 mg/g。比較DPPH自由基清除能力發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯相活性最強(qiáng)，其IC50值為39.08μg/mL;在濃度為1.0 mg/mL時(shí)，對乙酰膽堿酯酶的活性抑制率達(dá)90.64％;在6.25μg/mL～100μg/mL濃度范圍內(nèi)對H2O2損傷的PC12