山東地區(qū)忍冬種質(zhì)資源比較研究.pdf

1、目的:經(jīng)過長期的自然選擇與人工定向培育,山東忍冬植株形態(tài)出現(xiàn)了分化變異,形成了數(shù)量眾多的種質(zhì)。對這些種質(zhì)的遺傳多樣性進(jìn)行評價,并對其產(chǎn)量與質(zhì)量進(jìn)行比較研究,為生產(chǎn)上高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)種質(zhì)的篩選提供參考;研究光照等因素對藥材質(zhì)量的影響,為確定合理的人工栽培措施提供指導(dǎo)。方法:從植株形態(tài)學(xué),果皮、種皮、花粉粒超微形態(tài),開花特性,種子蛋白、葉片過氧化物同工酶、藥材紅外光譜等方面對遺傳多樣性進(jìn)行評價;采用于花期每日計數(shù)植株開花數(shù)目的方法對產(chǎn)量進(jìn)行研究;

2、采用人工遮陰法設(shè)置不同的光照強度,微量元素的施用采用人工葉面噴施法,活性成分含量測定采用高效液相色譜法。結(jié)果:①不同種質(zhì)忍冬植株形態(tài)存在差異,表現(xiàn)在株型、枝條長度及纏繞程度、葉片毛被情況、花蕾形態(tài)及著生方式、果實及種子大小等方面不同,以花蕾、果實、種子等繁殖器官的相關(guān)測量數(shù)據(jù)為指標(biāo)進(jìn)行聚類分析,結(jié)果與當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)對品系的劃分結(jié)果稍有偏差,表明不同種質(zhì)間不僅其繁殖器官發(fā)生了變異,植株其他的表型特征亦發(fā)生了變異。②不同種質(zhì)忍冬果皮、種皮超微形態(tài)

3、均出現(xiàn)了變異,根據(jù)果皮表面角質(zhì)紋理的形態(tài),可以將其分為三類,結(jié)果與當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)對品系的劃分結(jié)果較一致。種質(zhì)17花粉粒極面觀為類方形,萌發(fā)孔為4個,與其他種質(zhì)間差異較大;其他種質(zhì)其花粉粒表現(xiàn)出較大一致性,表明親緣關(guān)系較近,但其大小、表面刺突密度及尖銳程度、萌發(fā)孔大小等存在差異,可以此進(jìn)行鑒別;根據(jù)花粉粒及萌發(fā)孔大小對所研究種質(zhì)進(jìn)行聚類分析,結(jié)果能較好的反應(yīng)種質(zhì)間的親緣關(guān)系。③不同種質(zhì)忍冬始花期除種質(zhì)17(5月24日)外,其他均為5月23日,表

4、現(xiàn)出較大一致性,但不同種質(zhì)間其盛花期、末花期及開花振幅存在差異,表明了種質(zhì)間的不同。④種子SDS-PAGE電泳分析結(jié)果表明,不同種質(zhì)間譜帶差異不大,不能作為種質(zhì)劃分的依據(jù)。葉片過氧化物酶分析結(jié)果表明,不同種質(zhì)間譜帶的數(shù)目、位置及強弱程度存在較大差異,可以作為金銀花種質(zhì)劃分的依據(jù)。采用FTIR紅外光譜三級鑒定技術(shù)對不同種質(zhì)忍冬花蕾進(jìn)行分析,結(jié)果表明,一維光譜有較大一致性,表明不同種質(zhì)間其主體成分相似;不同種質(zhì)間其二階導(dǎo)數(shù)光譜存在較大差異,

5、主要表現(xiàn)在吸收峰的位置上及部分吸收峰的強弱程度上存在差異;二維紅外光譜上,所研究種質(zhì)在1300～900cm-1波數(shù)范圍內(nèi)差異較大,表現(xiàn)在自動峰的數(shù)目及自動峰的強弱上各有不同,因此,傅立葉紅外光譜三級鑒定技術(shù)可以作為不同種質(zhì)金銀花鑒定的輔助手段。⑤綜合考慮產(chǎn)量與質(zhì)量兩大因素,認(rèn)為種質(zhì)7、種質(zhì)8為優(yōu)良種質(zhì);種質(zhì)19產(chǎn)量較低,木犀草苷含量不符合藥典規(guī)定,應(yīng)將其淘汰;種質(zhì)1、2、4、18活性成分含量均符合藥典規(guī)定,但產(chǎn)量較低,應(yīng)通過人工修剪、加

6、強人工管理等措施增加其產(chǎn)量;種質(zhì)5所測4種活性成分含量均較高,但因其植株長勢較弱,產(chǎn)量低,應(yīng)對其進(jìn)行提純、復(fù)壯;種質(zhì)3、17木犀草苷含量不符合藥典規(guī)定,產(chǎn)量中等,其是否可作為優(yōu)良種質(zhì)進(jìn)行推廣有待進(jìn)一步研究。相關(guān)性分析結(jié)果表明,綠原酸含量與咖啡酸含量存在顯著正相關(guān)(p＜0.05),花蕾長度與花蕾寬度、花蕾重與花蕾長度存在極顯著正相關(guān)(p＜0.01),花蕾重與花蕾寬度間存在顯著正相關(guān)(p＜0.05)。多重線性回歸分析結(jié)果表明,開花數(shù)目等因素

7、對藥材產(chǎn)量的影響大小為:開花數(shù)目＞花蕾干重＞花蕾長度＞花蕾寬度。⑥光照有助于增加忍冬葉片葉綠體光合色素含量、藥材可溶性糖含量及花蕾干重,木犀草苷和馬錢苷含量亦以自然光條件下為最大,相關(guān)性分析結(jié)果亦表明了這一點;微量元素對金銀花活性成分的影響是一個復(fù)雜過程,有些是正效應(yīng),有些是負(fù)效應(yīng),提示究竟施用哪種微量元素應(yīng)經(jīng)過具體實驗后確定;蚜蟲危害后,金銀花可溶性糖含量和單花重量均降低,所測綠原酸等4種活性成分的含量均比正常植株低,提示忍冬人工栽培