肌成纖維細胞自噬趨勢對腎組織損傷的影響.pdf

1、目的：
　　通過觀察UUO大鼠腎臟肌成纖維細胞自噬相關蛋白α-SMA、LC-3的表達，探討肌成纖維細胞自噬趨勢對早期腎組織損傷的影響。
　　方法：
　　采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎方法建立腎組織損傷模型，實驗動物為72只健康雄性SD大鼠,體重110±20g,，隨機分為三組：假手術(shù)組(手術(shù)分離但不結(jié)扎左側(cè)輸尿管)，模型組(手術(shù)分離并結(jié)扎輸尿管近腎盂段)及治療組(輸尿管結(jié)扎后用雷帕霉素治療)。造模成功后，分別于3，7，10，14天在

2、各組中隨機處死6只大鼠，行Masson染色動態(tài)觀察各組梗阻側(cè)腎組織損傷程度，免疫組織化學染色法檢測各組α-SMA、LC-3在腎組織的表達及分布變化。
　　結(jié)果：
　　（1）Masson染色顯示假手術(shù)組腎組織無明顯病理變化；模型組可見腎小管上皮腫脹，炎性細胞增多浸潤，腎間質(zhì)中深藍色陽性染色面積明顯可見，梗阻時間越長越明顯，各時間點比較有顯著差異（P＜0.01）。雷帕霉素治療組也可見腎小管上皮腫脹，炎性細胞增多浸潤，但腎間質(zhì)中深

3、藍色陽性染色面積在各時間點較模型組明顯減少（P＜0.01），但仍多于假手術(shù)組（P＜0.01）。（2）免疫組織化學方法檢測腎臟中α-SMA、LC-3的表達：假手術(shù)組：腎臟α-SMA蛋白表達于血管平滑肌細胞胞漿，余腎臟細胞無表達，各時間點無明顯差異（P>0.05）；而腎臟血管平滑肌細胞、腎小管上皮細胞、足細胞等處可見LC-3蛋白表達。模型組：隨著梗阻時間的延長，逐漸于腎間質(zhì)、腎小管上皮細胞、腎小球系膜區(qū)可見α-SMA蛋白表達且表達水平逐漸升

4、高；LC-3蛋白在腎臟表達部位與假手術(shù)組大致相同，但在腎間質(zhì)、腎小管上皮細胞、腎小球系膜處表達水平明顯高于假手術(shù)組，各時間點比較差異顯著（P<0.01）。雷帕霉素治療組：α-SMA，LC-3表達部位、趨勢同模型組，α-SMA表達水平低于模型組， LC-3則高于模型組（P<0.01），但兩者表達水平均高于同時間點假手術(shù)組。
　　結(jié)論：
　　腎梗阻早期，肌成纖維細胞自噬水平顯著增加，提示梗阻早期肌成纖維細胞自噬水平明顯增高；雷帕