工頻磁場對中國倉鼠肺成纖維細(xì)胞自噬的誘導(dǎo)作用.pdf

1、目的:隨著電力事業(yè)的發(fā)展,人群接觸極低頻磁場的時(shí)間和強(qiáng)度愈來愈大,人們對極低頻磁場的效應(yīng)也愈加關(guān)注。早期的研究表明極低頻磁場可以誘導(dǎo)細(xì)胞分子水平的改變,如:細(xì)胞縫隙連接功能(GJIC)下降、細(xì)胞膜表皮生長因子受體(EGFR)和腫瘤壞死因子受體(TNFR)聚簇,以及基因和蛋白質(zhì)表達(dá)譜發(fā)生改變等等[1-5]。細(xì)胞自噬是機(jī)體重要的一種防御和保護(hù)機(jī)制,它大量降解并重復(fù)利用長壽命蛋白質(zhì)、大分子物質(zhì)以及細(xì)胞內(nèi)受損的細(xì)胞器等,使細(xì)胞能夠在饑餓環(huán)境下得

2、以生存[6],細(xì)胞自噬和神經(jīng)退行性疾病[7]、衰老[8]以及腫瘤相關(guān)[9]。有研究發(fā)現(xiàn)電離輻射如γ射線[10],非電離輻射如紫外線[11]等均會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞自噬效應(yīng),本研究初步探索與人們?nèi)粘Ｉ蠲芮邢嚓P(guān)的工頻磁場(50 Hz0.4 mT)對中國倉鼠肺成纖維細(xì)胞(Chinese hamster lung cells,CHL)的細(xì)胞自噬的誘導(dǎo)。
　　 方法:CHL細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí),更換新鮮的培養(yǎng)基后進(jìn)行50 Hz0.4 mT工頻磁場暴露

3、30分鐘、2小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)或者24小時(shí),磁場暴露后通過以下三種方法檢測細(xì)胞自噬水平:透射電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)空泡變化,激光共聚焦顯微鏡檢測細(xì)胞內(nèi)GFP-LC3定位自噬小體情況以及Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞內(nèi)LC3-Ⅱ表達(dá)。
　　 結(jié)果:透射電子顯微鏡觀察到,工頻磁場暴露30分鐘和24小時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)空泡增加；激光共聚焦顯微鏡觀察到,在GFP-LC3高表達(dá)的CHL細(xì)胞內(nèi),工頻磁場暴露不同時(shí)間點(diǎn)誘導(dǎo)GFP-LC3亮點(diǎn)標(biāo)記的