2型糖尿病大鼠胰島細(xì)胞肝X受體α的表達(dá).pdf

1、目的:觀察鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠胰島細(xì)胞分泌功能紊亂及胰島肝X受體α(Liver X Receptorα,LXRα)mRNA和蛋白的表達(dá)情況,進(jìn)而闡明胰島肝X受體α表達(dá)異常是否和胰島細(xì)胞分泌功能紊亂有關(guān)。
　　 方法:
　　 1.將40只雄性WISTA大鼠隨機(jī)分為三組:對照(NC)組10只、肥胖(FAT)組10只及糖尿病(DM)組20只。
　　 2.NC組大鼠給予國

2、家標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動物飼料喂養(yǎng)24周,FAT組和DM組大鼠給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)12周后,進(jìn)行糖尿病大鼠造模,即DM組按25～35mg/kg體重分2～3次腹腔注射10mg/ml STZ溶液選擇性破壞部分胰島細(xì)胞以誘導(dǎo)糖尿病的發(fā)生,以注藥72小時后大鼠尾靜脈取血測隨機(jī)血糖≥16.7 mmol/L為成模標(biāo)準(zhǔn);FAT組大鼠則按30mg/kg體重腹腔注射檸檬酸鹽緩沖液作為對照。糖尿病大鼠造模成功后FAT組和DM組繼續(xù)予以高脂高糖飼料喂養(yǎng)12周。

3、　　 3.糖尿病大鼠造模后第12周,用0.4％戊巴比妥鈉麻醉各組大鼠,開腹從下腔靜脈取靜脈血測定并且比較各組大鼠空腹血糖(Fasting BloodGlucose,FBG)、血總膽固醇(Total Cholesterol,TC),血甘油三酯(Triglyeride,TG)、血胰島素(Fasting serum insulin,FINS)水平的變化。計算并比較各組胰島素敏感指數(shù)(insulin sensitivity index,ISI

4、),ISI'=-ln(ISI)。
　　 4.處死大鼠,取出胰腺組織及分離胰島細(xì)胞,分別用熒光定量PCR(SVBR(R)Green)及免疫組化的方法檢測各組大鼠胰島細(xì)胞肝X受體mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.分組前,各組大鼠空腹血糖水平及體重?zé)o差異。成模后DM組大鼠多飲、多食、多尿,體重減少等癥狀比較明顯。DM組大鼠體重明顯低于FAT組和NC組(P＜0.05)。FAT組體重明顯高于NC組(P＜0.0

5、5),平均增高約70g。DM組及FAT組FBG、TC、TG水平較NC組明顯升高,(P＜0.05);DM組大鼠FBG、TC水平較FAT組也有升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),而兩組TG水平無明顯差異(P＞0.05);FAT組FBG水平與NC組無明顯差異(P＞0.05)。胰島素抵抗的判定用胰島素敏感指數(shù)ISI(Insulin Sensitivity Index):ISI=1/(FIN X FBG),FIN單位為mIU/L,FBG單位為

6、mmol/L,取自然對數(shù)使其正態(tài)化后進(jìn)行分析。DM組與FAT組大鼠ISI明顯低于NC組(P＜0.05),DM組的ISI比FAT組更低(P＜0.05),表示出更加嚴(yán)重的胰島素抵抗。
　　 2.DM組與FAT組、與NC組比較胰島細(xì)胞肝X受體αmRNA表達(dá)分別上調(diào)約3倍、12倍(P＜0.05)。FAT組與NC組比較胰島細(xì)胞肝X受體αmRNA表達(dá)上調(diào)了約4倍(P＜0.05)。
　　 3.免疫組化統(tǒng)計結(jié)果顯示在胰島細(xì)胞內(nèi)LXRα的