Tacrolimus對糖尿病大鼠腎臟巨噬細胞Toll樣受體2與4表達的影響.pdf

1、背景與目的:糖尿病腎病(Diabeticnephropathy,DN)是糖尿病微血管的嚴重并發(fā)癥之一,目前已逐漸成為導致終末期腎病的主要原因。DN的發(fā)病機制至今并不十分清楚,近年來炎癥學說倍受關(guān)注,并認為由巨噬細胞所介導的炎癥反應(yīng)是導致DN持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵因素。然而處于靜息或非活化狀態(tài)的巨噬細胞并無損傷作用,只有被激活的巨噬細胞才能有效發(fā)揮其炎癥效應(yīng)。Toll樣受體家族(TLRs)正是參與免疫炎癥反應(yīng)的一個關(guān)鍵因素,且認為是介導免疫和炎癥

2、反應(yīng)的主體。Tacrolimus(FK506)作為一種新型的免疫抑制劑,臨床主要用于器官移植、風濕免疫性疾病和難治性腎病等。我們先前的研究表明Tacrolimus可通過抑制鈣神經(jīng)蛋白(Calcineurin,CaN)及骨橋蛋白(0stepontin,OPN)等途徑對糖尿病腎臟產(chǎn)生保護作用;進一步研究后發(fā)現(xiàn)Tacrolimus可抑制糖尿病腎臟巨噬細胞的激活,但具體機制不明。本研究將以巨噬細胞作為治療靶點來探討Tacrolimus對糖尿病腎

3、臟內(nèi)巨噬細胞Toll樣受體(Toll-likereceptor,TLR)2和TLR4表達的調(diào)節(jié)作用。
　　方法:采用鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導大鼠糖尿病模型,隨機分為對照組(C)、模型組(Diabetesmellitus,DM)、Tacrolimus0.5mg·kg-1d-1給藥組及Tacrolimus1.0mg·kg-1d-1給藥組。Tacrolimus按0.5,1.0mg·kg-1d-1灌胃,正常組

4、和模型組每日給予等量溶劑。4周后檢測大鼠一般指標,包括血糖、體重、相對腎重(腎重/體重)(Relativeweightofkidney,RKW)、尿白蛋白排泄率(Urinaryalbuminexcretionrate,UAER)等變化,并應(yīng)用免疫組化單染及雙染技術(shù)檢測各組大鼠腎組織巨噬細胞浸潤(單核/巨噬細胞表面特異性標志抗原ED-1+細胞),TLR2,TLR4,核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB-p-p65)表達情況。
　　結(jié)果:1.

5、各組大鼠生化指標變化與對照組相比,模型組大鼠表現(xiàn)為血糖升高、體重下降、相對腎重增加,Tacrolimus各給藥組沒有防止大鼠血糖升高及體重下降。Tacrolimus0.5mg·kg-1d-1給藥組大鼠相對腎重較模型組有所下降,但未達統(tǒng)計學意義,Tacrolimus1.0mg·kg-1d-1給藥組大鼠相對腎重則明顯低于模型組(P<0.05)。模型組大鼠UAER明顯高于對照組(P<0.01),Tacrolimus給藥4周組大鼠UAER水平明

6、顯低于模型組(P<0.05,0.01)。2.各組大鼠腎組織巨噬細胞浸潤與NF-κB-p-p65表達情況,腎臟巨噬細胞TLR2,TLR4表達情況模型組大鼠腎組織浸潤巨噬細胞數(shù)、NF-κB-p-p65+及TLR2+,TLR4+的巨噬細胞數(shù)明顯高于對照組(P<0.01)。Tacrolimus0.5與1.0mg·kg-1d-1給藥組大鼠腎組織浸潤巨噬細胞數(shù)與模型組比較無明顯差異,而NF-κB-p-p65+細胞數(shù)及TLR2+,TLR4+的巨噬細胞