TDZd-8對(duì)小鼠急性胰腺炎治療作用的研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過腹腔注射雨蛙素（1次/小時(shí)×13小時(shí)）制作BALB/c小鼠急性胰腺炎模型，腹腔給予TDZD-8(4-芐基-2-甲基-1，2，4-噻二唑烷-3，5-二酮)，通過比較治療組與模型組小鼠血淀粉酶(Amylase)、白介素-6(IL-6)水平，免疫組化法分析小鼠核因子表達(dá)，HE染色法觀察比較不同組間小鼠胰腺病理損傷程度，參照Schmidt's方法進(jìn)行胰腺病理評(píng)分，探討TDZD-8對(duì)小鼠急性胰腺炎模型的治療作用及機(jī)制。
　　

2、 方法:隨機(jī)選取健康雄性清潔級(jí)BALB/c小鼠54只，體重20±2g，河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，將以上小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（C組），急性胰腺炎組（A組），TDZD-8治療組（T組），各實(shí)驗(yàn)組根據(jù)3h，6h，12h不同時(shí)間點(diǎn)再分為3個(gè)亞組，每個(gè)亞組6只小鼠。急性胰腺炎模型制作采用腹腔注射雨蛙素（50μg/Kg體重），每小時(shí)注射一次，共注射13次。對(duì)照組腹腔注射等體積的生理鹽水，每小時(shí)注射一次，共注射13次。TDZD-8治療組在末次注射

3、雨蛙素后半小時(shí)，腹腔注射TDZD-8（10mg/kg體重，溶于10％DMSO中），A組、C組分別在相同時(shí)間點(diǎn)注射等體積的10％DMSO。各組小鼠在相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)分別采用摘眼球取血法取血，用于檢測(cè)各組小鼠血液中血淀粉酶、IL-6水平，同時(shí)取小鼠胰腺組織，每個(gè)胰腺組織均分為兩部分，立即用10％福爾馬林溶液固定，其中一部分行HE染色，病理觀察，另一部分行免疫組化檢測(cè)NF-κB表達(dá)水平，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用spss13.0軟件進(jìn)行處理，兩組數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)

4、，血淀粉酶、血IL-6值多組數(shù)據(jù)比較采用方差分析SNK法，免疫組化評(píng)分與病理評(píng)分采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)及Mann-Whitney U檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、對(duì)照組血清淀粉酶水平各亞組內(nèi)無明顯差異，模型組、治療組內(nèi)各個(gè)亞組隨時(shí)間延長(zhǎng)，血清淀粉酶均呈升高趨勢(shì)，其中模型組血淀粉酶水平從3小時(shí)組的3909.17±454.47U/L逐漸增加到5217.08±585.34

5、U/L，治療組血淀粉酶水平從3小時(shí)組的2644.87±307.86U/L逐漸增加到3872.84±350.31U/L。各個(gè)亞組間具有明顯差異(P＜0.05)。模型組與治療組各亞組血清淀粉酶水平較對(duì)照組均有明顯升高(P＜0.05)，而治療組各時(shí)間點(diǎn)血淀粉酶水平與相同時(shí)間點(diǎn)模型組的水平相比均有所降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2、對(duì)照組各亞組內(nèi)IL-6水平無明顯差異，模型組與治療組各時(shí)間點(diǎn)血IL-6水平與對(duì)照組比較

6、有明顯升高趨勢(shì)，其中模型組血IL-6水平從3小時(shí)組的93.19±5.86U/L逐漸增加到144.42±19.49pg/ml，治療組血IL-6水平從3小時(shí)組的71.91±6.72pg/ml逐漸增加到109.45±11.39pg/ml，且各個(gè)亞組內(nèi)隨著時(shí)間點(diǎn)延長(zhǎng)，IL-6水平呈逐漸升高趨勢(shì)，同時(shí)，治療組各亞組內(nèi)IL-6水平與同時(shí)間點(diǎn)模型組相比較，IL-6水平有所降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 3、免疫組化檢測(cè)顯示，

7、對(duì)照組中胰腺組織NF-κB少量表達(dá)，模型組NF-κB大量表達(dá)，治療組胰腺組織中NF-κB表達(dá)較對(duì)照組明顯增多，但與模型組相比，NF-κB表達(dá)有所減少(P＜0.05)。
　　 4、小鼠胰腺觀察:對(duì)照組胰腺未見充血、水腫及滲出;模型組小鼠胰腺可見充血、水腫，同時(shí)可見腹腔內(nèi)少量腹水;TDZD-8治療組小鼠胰腺輕度腫脹、充血，未見明顯腹水。
　　 5、胰腺組織病理學(xué)評(píng)分結(jié)果:對(duì)照組胰腺無水腫、出血、炎細(xì)胞浸潤(rùn)及壞死，模型組胰腺小

8、葉間隙增寬，腺泡水腫，片狀壞死，實(shí)質(zhì)及間質(zhì)內(nèi)可見大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);治療組胰腺可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，但較A組有所減少，腺泡水腫，炎癥程度較A組減輕，治療組、模型組與對(duì)照組相比，病理評(píng)分具有顯著性差異(P＜0.05);模型組與治療組各亞組隨著時(shí)間點(diǎn)的延長(zhǎng)，病理評(píng)分有增高趨勢(shì)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、急性胰腺炎時(shí)核因子表達(dá)增多，炎性因子數(shù)量增加，進(jìn)一步引起胰腺損傷。
　　 2、GSK3