日本血吸蟲致病性與其遺傳學特征關系的研究.pdf

1、目的：血吸蟲病是一種流行廣泛、嚴重危害人類健康的人獸共患寄生蟲病。我國屬于血吸蟲病流行最嚴重的國家之一，主要流行日本血吸蟲病。日本血吸蟲的生活史比較復雜，在中間宿主（釘螺）體內進行無性生殖，在終宿主（哺乳動物）體內進行有性生殖。個體遺傳學差異影響血吸蟲的交配選擇在終宿主體內已有研究，然而有關于血吸蟲個體遺傳學差異是否影響其對終宿主的致病性，尚罕有研究。因此本實驗利用微衛(wèi)星位點技術對日本血吸蟲成蟲DNA進行基因分型，進而分析日本血吸蟲配對

2、個體間的遺傳差異性和雜合度差異，觀察配對個體間的遺傳學差異與其對終宿主致病性的關系。有助于深入了解血吸蟲的致病性和傳播特征，同時為進一步有效地控制血吸蟲病流行提供新的思路。
　　方法：室內單條毛蚴攻擊感染釘螺所形成的感染性釘螺，經(jīng)確定其逸出尾蚴的性別后，對相應感染性釘螺逸出的雌雄尾蚴進行隨機配對，即以1只釘螺逸出的雌性尾蚴5條和另1只釘螺逸出的雄性尾蚴10條感染BALB/c小鼠，感染35d后收集血吸蟲蟲體、計數(shù)，計算肝重/體重/對

3、成蟲、脾重/體重/對成蟲、平均每對成蟲肝臟沉積蟲卵數(shù)、平均每對成蟲腸組織沉積蟲卵數(shù)、肝臟蟲卵孵化率和肝臟肉芽腫的平均直徑。
　　提取雌雄成蟲的DNA，應用微衛(wèi)星位點進行標記，進行多重PCR，擴增產物片段長度由上海生物工程（生工）有限公司檢測。配對雌雄血吸蟲個體的遺傳相似性采用r系數(shù)估算，由軟件SPAGeDI1.4得到；雜合度為蟲體雜合位點數(shù)占蟲體所有位點數(shù)的比例，計算配對雌雄血吸蟲個體雜合度的差值（△H），即△H=雄蟲雜合度―雌蟲

4、雜合度。
　　結果：
　　1.配對日本血吸蟲個體間的遺傳相似性與平均每對成蟲肝臟沉積蟲卵數(shù)（r=0.5016，P=0.0478）、平均每對成蟲腸組織沉積蟲卵數(shù)（r=0.7965，P=0.0002）、肝臟蟲卵孵化率（r=0.5083，P=0.0444），呈正相關，關聯(lián)均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與肝重/體重/對成蟲（r=0.1095，P=0.6865）、脾重/體重/對成蟲（r=0.2653，P=0.3206）呈正相關，與肝

5、臟肉芽腫的平均直徑（r=－0.2727，P=0.3069）呈負相關，關聯(lián)均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2.配對日本血吸蟲個體間的雜合度差值△H的不同，△H<0（雄蟲雜合度小于雌蟲）平均每對成蟲腸組織沉積蟲卵數(shù)和肝臟蟲卵孵化率均顯著高于（分別為P=0.0023、P=0.0102）△H=0（雌雄蟲體雜合度相等）；△H>0（雄蟲雜合度大于雌蟲）平均每對成蟲腸組織沉積蟲卵數(shù)和肝臟蟲卵孵化率，均顯著高于（分別為P=0.0069、P=

6、0.0161）△H=0；△H=0肝重/體重/對成蟲和脾重/體重/對成蟲均顯著高于（分別為P=0.0164、P=0.0153）△H<0；△H=0肝重/體重/對成蟲和脾重/體重/對成蟲均顯著高于（P=0.0040、P=0.0105）△H>0；△H=0、△H<0、△H>0在平均每對成蟲肝臟沉積蟲卵數(shù)和肝臟肉芽腫平均直徑，均沒有顯著性差異（P>0.05）；病理指標在△H<0與△H>0之間均沒有顯著性差異（P>0.05）。
　　結論：

7、>　　1.日本血吸蟲對其終宿主的致病性與配對個體間遺傳差異性有關，并且遺傳差異性越大，其致病性越弱?？赡苁且驗檠x的致病性和傳播存在與基因相關的平衡作用，也可能與血吸蟲在中間宿主和終宿主體內的增殖呈負相關有關。
　　2.日本血吸蟲配對個體間雜合度差異影響其在終宿主階段的傳播和致病性，雜合度有差異的雌雄蟲體配對，在終宿主階段的傳播率較高，而雜合度相等的雌雄蟲體配對，其致病性更強。
　　3.對遺傳差異性和雜合度差異的分析有助于