日本血吸蟲重組烯醇化酶研究.pdf_第1頁
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1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文日本血吸蟲重組烯醇化酶研究姓名：邱春輝申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：王壽昆林矯矯20090401福建農(nóng)林碩士學(xué)位論文AbstractSchistosomiasiscausedbyinfectionwithSchistosomejaponicum，isthemostharmfulparasiticzoonosisinChinaThecurrentcontroleffortsdependmainlyon

2、praziquantelchemotherapyHowever，praziquantel，thesolewidespreadefficientdrugforschistosomasis，can’tavoidhighratesofreinfectionaftermasstreatmentMoreover，thedevelopmentofresistancetopraziquanteilimitsstrategiesbasedonchemo

3、therapyTherefore，itisnecessarytodevelopanefficientsafevaccineandnewantheiminticdrugsagainstschistosomeSchistosomiasislikesotherparasite，whichhastheexchangeofsubstancesandenergybymetabolisminthehostAtpresentpeopleareconvi

4、ncedthattheenergyacquisitionofSchistosomiasisrelysmainlyonglycolysispathwayTheenolaseplaysaroleinglycolysispathwaythatisakeypathwayinenergeticmetabolismofcellIt’sveryimportantinthegrowthanddevelopmentofanimalSo，wecloned，

5、overexpressed，detectedthepositionofthisenolaseanddidsomebasicbiologicfunctionresearchinthisarticle1AccordingtoGenBankID，aspecificprimerwasdesignedThenwegottheDNASequenceofSchistosomajaponicumEnolase(SjEno)Thesequenceincl

6、udingacompleteopenreadingframecontains1305nucleotides，andencodes434aminoacidsItsmolecularweightintheoryisabout47KDTheSjEnocDNAfragmentwassubclonedintoexpressionvectortoconstructprokaryoticexpressingplasmidspET28a()SjEno，

7、andtransformedtoEcoliBL21(DH5a)TherecombinationproteinSjEno／HISwassuccessfullypurified2TheenolaseproteinwasrecognizedbytherabbitseraagainsttoadultwormantigeninwesternanalysisItsuggestedgoodantigenicityInthevaccinetrial，t

8、hepurifiedrSjEno／HISwasusedtoimmuneBalb／cmiceItshowed2428％livereggreductionand2145％faeceseggreduction，comparedwiththoseofthecontrolmiceELISAresultsuggestedthathighlevelsofspecificIgGinducedbytherecombitantproteinmayplaya

9、nimportantrolefortheprotectiveeffectonthevaccinatedmice3DetectionofSjEnobyimmunofluorescencemicroscopyusingamouseantibodyraisedagainstrecombinantSjEno／HISshowedthatSjEnowasexpressedintheoutertegumenl28dand42dadultworm；Th

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