2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、熱應(yīng)激影響雌性動物的許多生殖功能,如卵泡發(fā)育、卵母細(xì)胞成熟和早期胚胎發(fā)育。目前,研究表明熱應(yīng)激通過干擾動物的生殖內(nèi)分泌等發(fā)揮作用。同時,熱休克反應(yīng)依賴于細(xì)胞信號途徑的調(diào)控。因此,本論文以假孕大鼠為研究對象,建立熱應(yīng)激模型。應(yīng)用ELISA、Western blot和IHC等方法,研究孕酮合成及分解代謝相關(guān)蛋白及相關(guān)信號通路元件的表達(dá)模式,以揭示熱應(yīng)激影響卵巢黃體退化的作用機制,為研究熱應(yīng)激影響雌性動物繁殖性能提供理論依據(jù)。主要內(nèi)容如下:<

2、br>  1熱應(yīng)激對大鼠黃體孕酮合成及分解代謝相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
  為探討熱應(yīng)激對黃體孕酮合成及分解代謝通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,本研究采用PMSG/hCG(D0)聯(lián)合處理70只(28日齡)大鼠誘導(dǎo)假孕,然后隨機分為非熱應(yīng)激(NHS)和熱應(yīng)激(HS)兩組。每天在相同時間,將HS組置于40℃熱應(yīng)激2h。每天測定大鼠的飲水量、采食量及熱應(yīng)激前后的直腸溫度。假孕第3天,熱應(yīng)激結(jié)束后2h,采集兩組大鼠的血清和卵巢組織(n=5)。假孕第7天

3、,熱應(yīng)激結(jié)束后2h,處死或PGF分別處理0h、1h、2h、8h或24 h后處死,然后收集血清和卵巢組織(n=5)。應(yīng)用ELISA檢測血清孕酮濃度、Western blot和IHC檢測孕酮合成及分解代謝通路相關(guān)蛋白的表達(dá)。ELISA結(jié)果表明,熱應(yīng)激對黃體形成過程中孕酮濃度無顯著影響。Western blot結(jié)果表明熱應(yīng)激對黃體形成過程中StAR、P450scc和3βHSD表達(dá)無顯著影響,但PKA磷酸化底物在第3天表達(dá)高于第7天(P<0.0

4、5)。PGF降低了兩組大鼠血清孕酮濃度,且熱應(yīng)激抑制了PGF誘導(dǎo)的孕酮濃度下降(P<0.05);PGF或熱應(yīng)激單一處理均對PKA磷酸化底物、StAR、P450scc、3βHSD及NR4A1-F表達(dá)無顯著影響,但均誘導(dǎo)NR4A1-S表達(dá)上調(diào)(P<0.05),且熱應(yīng)激降低PGF誘導(dǎo)的NR4A1-S表達(dá)(P<0.05);IHC結(jié)果表明,PKA磷酸化底物主要在黃體細(xì)胞的細(xì)胞核中表達(dá),而StAR、P450scc、3βHSD和NR4A1-F均在黃體

5、細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)表達(dá)。上述結(jié)果提示,熱應(yīng)激降低假孕大鼠PGF誘導(dǎo)的黃體退化過程中NR4A1-S的表達(dá),NR4A1-S可能參與調(diào)控黃體退化過程中孕酮的分解代謝。
  2熱應(yīng)激對大鼠黃體退化中ERK1/2磷酸化及HSP70與ATF3表達(dá)的影響
  為研究熱應(yīng)激對PGF誘導(dǎo)的黃體退化過程中HSP70及MAPK/ATF3和PKB信號通路元件表達(dá)的影響,以假孕大鼠為試驗對象,構(gòu)建熱應(yīng)激模型(同試驗1)。假孕第7天,熱應(yīng)激結(jié)束2h后,大鼠以

6、PGF分別處理0h、1h、2h、8h或24 h后處死,收集卵巢組織。應(yīng)用Western blot和IHC檢測HSP70及MAPK/ATF3和PKB信號通路元件蛋白的表達(dá)。Western blot結(jié)果表明:與NHS組相比,熱應(yīng)激沒有改變HSP70和p-ERK-1/2的基礎(chǔ)水平,但熱應(yīng)激促進PGF誘導(dǎo)的HSP70和p-ERK-1/2水平的上升(P<0.05);熱應(yīng)激促進p-p38 MAPK基礎(chǔ)水平的上調(diào)(P<0.05);在PGF處理2h后,

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