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1、慢性熱應(yīng)激作為熱應(yīng)激的一種,隨著全球氣候的變暖,越來(lái)越受到人們的重視。國(guó)內(nèi)外已有研究表明熱應(yīng)激不僅對(duì)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能、繁殖性能造成影響,同樣對(duì)機(jī)體免疫功能造成影響。但關(guān)于慢性熱應(yīng)激對(duì)機(jī)體免疫功能影響方面的研究,卻缺乏全面深入的研究報(bào)道。為此,本研究首先根據(jù)北京夏季的高溫氣候,以豬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)置了具有實(shí)踐指導(dǎo)意義的慢性熱應(yīng)激環(huán)境條件。在此基礎(chǔ)上從分子水平,采用免疫組織化學(xué)、ELISA、掃描電鏡、流式細(xì)胞術(shù)等方法,研究了慢性熱應(yīng)激對(duì)豬外周血、
2、脾臟及腸道中T細(xì)胞分布的影響,同時(shí)觀察了對(duì)用口蹄疫核酸疫苗抗原刺激后小鼠的特異性的體液免疫和細(xì)胞免疫功能的變化。主要研究結(jié)果如下: 1.實(shí)驗(yàn)豬在39℃,4h/d,持續(xù)10天的環(huán)境條件下,脾臟及腸道中的HSP70表達(dá)量顯著增加,日增重顯著下降,證明此慢性熱應(yīng)激環(huán)境條件設(shè)置成功。對(duì)豬小腸的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果表明:在慢性熱應(yīng)激條件下,小腸組織結(jié)構(gòu)、超微結(jié)構(gòu)及腸黏膜上皮中的AKP酶活性均發(fā)生了顯著的變化,這些變化是實(shí)驗(yàn)豬日增重下降的重要形態(tài)
3、學(xué)依據(jù)。 2.在慢性熱應(yīng)激條件下,實(shí)驗(yàn)豬血清中IFN-γ水平顯著下降,IL-4水平稍有下降,IL-2水平顯著上升,TNF-α水平有所上升,IFN-γ/IL-4比值下降:脾臟中CD3+和CD4+T細(xì)胞數(shù)量均顯著上升,CD8+T細(xì)胞數(shù)量基本不變,CD4+/CD8+比值上升;小腸中CD3+T細(xì)胞數(shù)量顯著上升。這些結(jié)果表明:慢性熱應(yīng)激時(shí),實(shí)驗(yàn)豬體內(nèi)的T細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子均發(fā)生了明顯的變化,提示慢性熱應(yīng)激時(shí),機(jī)體的免疫功能,尤其是細(xì)胞免疫
4、功能處于紊亂狀態(tài)。 3.在慢性熱應(yīng)激條件下,小鼠免疫口蹄疫核酸疫苗后,血清總IgG和IgG1的水平下降不明顯,IgG2a的水平顯著下降;特異性T細(xì)胞增殖反應(yīng)水平顯著降低;脾臟中CD4<'+>IFN-γ<'+>和CD8<'+>IFN-γ<'+>的表達(dá)量顯著降低,CD4<'+>IL-4<'+>表達(dá)量基本無(wú)變化;體內(nèi)CTL,反應(yīng)水平顯著下降(機(jī)體對(duì)靶細(xì)胞特異性的殺傷率從43.2%下降到26.2%)。這些結(jié)果表明,慢性熱應(yīng)激主要降低了機(jī)
5、體的細(xì)胞免疫功能,對(duì)體液免疫功能影響不顯著。 上述結(jié)果從分子水平揭示了:慢性熱應(yīng)激通過(guò)影響實(shí)驗(yàn)豬外周血、脾臟及腸道中的T細(xì)胞數(shù)量、分布及相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá),破壞了機(jī)體的免疫平衡,使機(jī)體的免疫功能處于紊亂的狀態(tài);慢性熱應(yīng)激降低了口蹄疫核酸疫苗在小鼠上的免疫效果,其中以抑制細(xì)胞免疫反應(yīng)為主,體液免疫反應(yīng)為輔。本研究首次從分子水平揭示了慢性熱應(yīng)激條件下,機(jī)體免疫功能的變化情況,為認(rèn)識(shí)熱應(yīng)激發(fā)生的機(jī)制提供了新的有價(jià)值的資料,為尋求應(yīng)激性
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