脫細(xì)胞纖維環(huán)基質(zhì)的制備及其復(fù)合材料對(duì)纖維環(huán)源干細(xì)胞分化的調(diào)控研究.pdf

1、目的：制備豬源性脫細(xì)胞纖維環(huán)基質(zhì)（Decellularized Annulus Fibrosus Matrix，DAFM）,探究該基質(zhì)對(duì)兔纖維環(huán)源干細(xì)胞（Annulus Fibrosus-derived stem cells，AFSCs）的分化行為的作用。最終制備具有不同彈性模量的脫細(xì)胞纖維環(huán)基質(zhì)復(fù)合材料，考察其對(duì)兔纖維環(huán)源干細(xì)胞分化的調(diào)控作用。
　　方法：通過(guò)豬纖維環(huán)組織制備DAFM膜，并從新西蘭大白兔獲得AFSCs后，將其接種

2、于 DAFM膜上，分別進(jìn)行成脂、成骨、成軟骨三系分化誘導(dǎo)，以染色及RT-qPCR考察DAFM對(duì)干細(xì)胞分化行為的影響；將AFSCs種植于涂覆DAFM與涂覆I型膠原的不同彈性模量聚丙烯酰胺凝膠（Polyacrylamide Gel，PAG）上，通過(guò)RT-qPCR及Elisa比較AFSCs在兩者上的分化能力；制備不同彈性模量的DAFM與殼聚糖結(jié)合的復(fù)合材料，通過(guò)RT-qPCR，Elisa等方法測(cè)定AFSCs在其之上的分化能力。
　　結(jié)果

3、：制備出豬源DAFM；AFSCs在DAFM上生長(zhǎng)良好，誘導(dǎo)分化結(jié)果顯示DAFM能較好維持AFSCs的干細(xì)胞分化差異性。制備出涂覆DAFM與涂覆collagen-I的 PAG；實(shí)驗(yàn)顯示 AFSCs在兩者材料之上的增殖性能良好，但基因及蛋白檢測(cè)均顯示AFSCs于涂覆DAFM的各彈性模量PAG上的collagen I，collagen II和aggrecan基因的表達(dá)量均更高；同時(shí)collagen I表達(dá)隨基質(zhì)彈性模量增大而增大，collag