生理濃度糖皮質(zhì)激素對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的心肌炎癥的抑制作用及機(jī)制研究.pdf

1、廣州醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文生理濃度糖皮質(zhì)激素對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的心肌炎癥的抑制作用及機(jī)制研究姓名：何艷華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：心血管內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：羅健東201105廣州醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文生理濃度糖皮質(zhì)激素對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的心肌炎癥的抑制作用及機(jī)制研究4抗炎調(diào)控作用引起致炎與抗炎因素失衡，促進(jìn)炎癥參與的疾病的發(fā)展。然而，內(nèi)源性的腎上腺GCs對(duì)心臟炎癥反應(yīng)抑制作用的細(xì)胞及分子水平的研究還不深入，本課題以成年SpragueDawley（SD）大鼠和培養(yǎng)

2、的成年SD大鼠心肌成纖維細(xì)胞(adultratcardiacfibroblasts，ARCFs)為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停瑥募?xì)胞和分子水平初步探討內(nèi)源性腎上腺GCs抗炎系統(tǒng)受損的具體機(jī)制，為內(nèi)源性抗炎機(jī)制受損參與心肌間質(zhì)重塑的病理生理機(jī)制研究提供新的思路和線(xiàn)索。通過(guò)阻斷內(nèi)源性抗炎作用受損可能會(huì)減慢心肌重塑的進(jìn)展和臨床心衰的發(fā)展，為心力衰竭的治療提供新的策略。第一部分生理濃度腎上腺糖皮質(zhì)激素對(duì)LPS誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞炎癥的抑制作用研究目的1.探討內(nèi)源

3、性GCs對(duì)心肌組織炎癥的抑制作用及作用的主要細(xì)胞靶點(diǎn)；2.探討體外生理濃度GCs對(duì)ARCFs炎癥的抑制作用及GCs抗炎作用抵抗的機(jī)制。方法1.體內(nèi)試驗(yàn)：SPF級(jí)SD雄性大鼠隨機(jī)分為五組，正常對(duì)照組，摘雙腎腎上腺(adrenalectomyADX)組，腹腔注射內(nèi)毒素(lipopolysacides，LPS)組，ADXLPS組和ADX給予補(bǔ)充生理水平氫化可的松后再注射LPS組。取各組心臟冰凍組織切片進(jìn)行炎癥因子白介素1(interleuki

4、n，IL1)免疫組織化學(xué)染色，觀察LPS誘導(dǎo)的心臟炎癥反應(yīng)的組織學(xué)變化及細(xì)胞定位及內(nèi)源性GCs的作用。2.體外試驗(yàn)：以培養(yǎng)的成年SD大鼠ARCFs為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?；?yīng)用不同濃度的LPS刺激成纖維細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzymelinkedimmuosbentassay，ELISA)炎癥因子，如腫瘤壞死因子a(tumnecrosisfacta，TNFa)IL1，IL6；觀察生理及藥理濃度的氫化可的松抗炎作用；應(yīng)用黃嘌呤氧