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文檔簡介
1、目的:探討外源性Apelin-13多肽對大鼠動脈粥樣硬化形成的影響及可能機(jī)制。
方法:將60只SD大鼠(7-8周齡,170-220 g)隨機(jī)分為4組:正常對照組(N組),高脂模型組(M組),低劑量apelin組(LA組),高劑量apelin組(HA組),每組15只。N組普通飼料喂養(yǎng),M、LA及HA組高脂喂養(yǎng),其中LA組和HA組在高脂喂養(yǎng)的同時隔天給予不同劑量apelin-13尾靜脈注射,M組隔天給予生理鹽水尾靜脈注射。在高脂喂
2、養(yǎng)開始,均一次性給予M、LA及HA組大鼠維生素D3(60×104IU/kg)腹腔注射。于12周末,麻醉大鼠后采取血液樣本及待超聲檢測,然后處死動物并留取組織標(biāo)本。相關(guān)試劑盒檢測大鼠血脂、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平;HE染色觀察主動脈弓處組織形態(tài)學(xué)變化;免疫組化觀察平滑肌肌動蛋白(α-SMA)及p22phox在各組血管的表達(dá);超聲觀察各組腹主動脈
3、病變情況;Western blot檢測各組p22phox、NF-kBp65、JNK及P-JNK的表達(dá)。
結(jié)果:1.與N組相比,其余三組血脂(除外HDL-C)均明顯升高(P<0.01);M組、LA組及HA組之間血脂無差異。與M組相比,LA組及HA組MDA均下降而SOD均升高,且HA組變化更顯著(P<0.01)。2.主動脈弓病理HE染色觀察:N組大鼠主動脈形態(tài)正常,無脂質(zhì)沉積等病理改變。M組及LA組主動脈內(nèi)膜明顯增厚、不光滑,纖維
4、斑塊形成伴大量炎癥細(xì)胞侵潤、膽固醇結(jié)晶及鈣化病灶,呈典型動脈粥樣硬化改變。HA組大鼠主動脈內(nèi)膜稍欠光滑,有輕微增厚,中層平滑肌細(xì)胞排列較紊亂,伴少量纖維增生及炎癥細(xì)胞侵潤。3.超聲檢測:N組及HA組大鼠腹主動脈未發(fā)現(xiàn)明顯病變,M及LA組大鼠腹主動脈內(nèi)膜欠清晰、不光滑、連續(xù)性中斷,管壁增厚,可見較小斑塊突出于管腔。4.免疫組化顯示M組、LA組及HA組主動脈α-SMA表達(dá)均顯著低于N組(P<0.01);LA組及HA組α-SMA表達(dá)高于M組(
5、P<0.01); HA組主動脈α-SMA表達(dá)顯著高于LA組(P<0.01)。p22phox在LA及HA組的表達(dá)明顯少于M組(P<0.01),且HA組p22phox表達(dá)較LA組明顯減少(P<0.01)。5.Western Blot顯示主動脈p22phox、NF-Kbp65及p-JNK在M組、LA組及HA組表達(dá)顯著高于N組(P<0.01); p22phox、NF-kBp65在HA組及LA組的表達(dá)顯著低于M組;p-JNK在LA組及M組間無差異
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