γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶與轉(zhuǎn)錄因子激活蛋白-1在吸煙氣道上皮細(xì)胞表達(dá)的研究.pdf

1、目的:(1)研究觀察不同吸煙時間對大鼠支氣管上皮細(xì)胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和轉(zhuǎn)錄因子激活蛋白-1(AP-1)表達(dá)的影響以及二者的相關(guān)性。(2)研究觀察吸煙對人氣道上皮細(xì)胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表達(dá)的影響,探討γ—GCS在吸煙所致慢性氣道炎癥及氧化／抗氧化失衡中的作用機(jī)制。
　　 方法:(1)自制大鼠實驗性被動吸煙裝置,建立吸煙引起慢性氣道炎癥的動物模型,將40只大鼠隨機(jī)分為不吸煙組、吸煙1月組、吸

2、煙2月組、吸煙3月組,每組各10只。分別采用免疫組織化學(xué)法檢測支氣管上皮細(xì)胞γ-GCS和AP-1(c—fos和c—jun)蛋白的表達(dá)水平。(2)選自2007年9月-2008年10月行支氣管鏡檢查的患者。吸煙指數(shù)>300支,平均年齡50±10歲。共60例,分為4組:吸煙組(慢性支氣管炎組、非慢性支氣管炎組),不吸煙組(慢性支氣管炎組、非慢性支氣管炎組),每組各15例。通過支氣管鏡刷檢獲取支氣管氣道上皮細(xì)胞,采用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測支氣管上皮

3、細(xì)胞中γ—GCS蛋白的表達(dá)水平。實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計。
　　 結(jié)果:1.香煙對大鼠支氣管上皮細(xì)胞γ—GCS表達(dá)的影響:(1)吸煙3月組大鼠出現(xiàn)了肺氣腫的病理改變；吸煙1月、2月和3月組大鼠支氣管上皮細(xì)胞γ—GCS蛋白表達(dá)的水平較不吸煙組明顯增高,差異有顯著性(P均<0.01),(2)吸煙各組大鼠支氣管上皮細(xì)胞c—fos、c—jun蛋白的表達(dá)水平均較不吸煙組明顯增高,差異有顯著性(P均<0.01),吸煙各組間比

4、較差異亦有顯著性(P分別<0.01);(3)吸煙1月組大鼠支氣管上皮細(xì)胞c—fos與c—jun蛋白的表達(dá)水平成直線正相關(guān)(r值分別為0.679、0.735；P值分別為0.031、0.015);c—fos與γ—GCS蛋白的表達(dá)水平成直線正相關(guān)(r值分別為0.703、0.724；P值分別為0.023、0.018)；c—jun與γ—GCS蛋白的表達(dá)水平成直線正相關(guān)(r值分別為0.641、0.747；P值分別為0.046、0.013)；(4)吸

5、煙3月組大鼠支氣管上皮細(xì)胞c—fos與c-jun蛋白的表達(dá)水平成直線正相關(guān)(r值分別為0.636、0.698；P值分別為0.048、0.025)；c—fos、c-jun與γ—GCS蛋白的表達(dá)水平無直線相關(guān)關(guān)系。2.吸煙對人氣道上皮細(xì)胞γ—GCS表達(dá)的影響:在氣管鏡下取人氣道上皮細(xì)胞,各組氣道上皮細(xì)胞γ—GCSh的表達(dá):(1)吸煙組(慢性支氣管炎組(0.198±0.097)、非慢性支氣管炎組(0.346±0.113))的氣道上皮細(xì)胞γ-G

6、CS的表達(dá)水平,低于不吸煙組(慢性支氣管炎組(0.403±0.102)、非慢性支氣管炎組(0.518±0.150))差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)；(2)慢性支氣管炎組(0.403±0.102)的氣道上皮細(xì)胞γ-GCS的表達(dá)水平,低于非慢性支氣管炎組(0.498±0.150)的表達(dá),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:1.隨著吸煙時間的延長,大鼠支氣管上皮細(xì)胞中γ—GCS蛋白表達(dá)水平逐漸增高；c—fos和c-j