我國貝類中赤潮毒素腹瀉性貝毒免疫檢測技術(shù)研究.pdf

1、分類號UDC密級單位代碼一坦上過一一一我國貝類中赤潮毒素腹瀉性貝毒免疫檢測技術(shù)研究劉仁沿指導(dǎo)教師馬德毅職稱研究員學(xué)位授予單位大連海事大學(xué)申請學(xué)位級別工學(xué)博士學(xué)科與專業(yè)環(huán)境科學(xué)論文完成日期2008年4月論文答辯日期加08年7月答辯委員會主席創(chuàng)新點摘要創(chuàng)新點摘要1、制備了對腹瀉性貝毒素主要成份軟海綿酸具有很強特異性的單克隆抗體。利用碳二亞胺縮合技術(shù)方法，以血藍蛋白作為偶聯(lián)載體蛋白，成功的合成了具有高免疫性的軟海綿酸一血藍蛋白偶合物，通過免疫

2、BalbC鼠，利用細胞融合技術(shù)，制備了優(yōu)良的抗腹瀉性貝毒主要成份軟海綿酸的單克隆抗體，為建立貝類中軟海綿酸的酶聯(lián)免疫和免疫層析檢測技術(shù)奠定了基礎(chǔ)。2、建立了貝類中軟海綿酸的酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)。使用制備的高抑制率的抗OA一KLH多克隆抗體和單克隆抗體，利用合成偶聯(lián)的軟海綿酸一卵清蛋白作為包被抗原，辣根過氧化物酶標記的羊抗鼠抗體作為酶標二抗，首次在國內(nèi)建立了貝類中腹瀉性貝毒主要成份軟海綿酸的間接競爭酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)，方法的靈敏度達到國際領(lǐng)先水

3、平。3、建立了貝類中軟海綿酸的膠體金標記免疫層析檢測技術(shù)。制備了軟海綿酸的膠體金標記免疫層析快速檢測卡。利用合成偶聯(lián)的軟海綿酸一卵清蛋白作為包被抗原，用膠體金標記制備純化的高抑制率的抗OA一KLH單克隆抗體，首次建立了膠體金免疫層析快速檢測軟海綿酸技術(shù)方法，并可滿足食品安全聞值檢出限要求。4、本研究建立的酶聯(lián)免疫吸附分析和膠體金標記免疫層析檢測貝類中軟海綿酸的方法可以滿足規(guī)定的20抖g1009貝肉的安全閩值，可應(yīng)用于貝類實際樣品的分析，