核黃素對脂質(zhì)代謝的影響及作用機制的初步探討.pdf

1、目的：本研究旨在通過調(diào)查了解天津市靜海縣368名40~60歲居民的血脂、血脂異常率和血清核黃素水平的現(xiàn)狀，并分析血脂異常人群和血脂正常人群血清核黃素水平的差異；同時通過動物實驗，初步探討核黃素對脂質(zhì)代謝的影響作用及調(diào)節(jié)機制，為核黃素膳食干預(yù)高血脂血癥人群提供理論依據(jù)。
　　方法：(一）人群調(diào)查：采用多階段整群隨機抽樣方法，于2012年選取天津市靜?？h6個村民委員會，在每個村民委員會中抽取75戶家庭中40~60歲的村民，共368名作

2、為研究對象（剔除不符合標準的戶數(shù)）。開展問卷調(diào)查、血液采集，采集的血清應(yīng)用高效液相色譜儀和全自動生化分析儀檢測血清核黃素和血脂水平；結(jié)合調(diào)查內(nèi)容和實驗數(shù)據(jù)，采用單因素方差分析和兩獨立樣本t檢驗分析。（二）動物實驗：參照方法[1]建立高脂血癥大鼠模型，將造模成功的大鼠分為5組，即：空白對照組（Control）、模型對照組（HF）、核黃素低劑量組（HF+LR）、核黃素中劑量組（HF+MR）、核黃素高劑量組（HF+HR），每組10只，共計50

3、只。核黃素干預(yù)組按照相應(yīng)劑量（HF+LR組：0.667mg/kg， HF+MR組：3.385mg/kg，HF+HR組：6.670mg/kg）干預(yù)60天，空白對照組和模型對照組給予生理鹽水，分別在第0天、第20天、第40天、第60天眼內(nèi)眥靜脈叢采血（不禁食）取血，全自動生化分析儀檢測血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平，計算AI、API和TC/HDL-C值，每周稱量

4、體重。實驗第61天（禁食）眼內(nèi)眥靜脈叢采血分離血清，ELISA法檢測血清載脂蛋白A1（ApoA1）、載脂蛋白B（ApoB）和卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶（LCAT）的水平，全自動生化分析儀檢測血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）水平；取部分肝組織參考文獻[2]制作10％肝勻漿，檢測肝勻漿中TC、TG和3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGR)的水平，用 HE染色和油紅 O染色制作肝組織病理切片，光鏡下觀察肝組織病理

5、學形態(tài)。應(yīng)用Real-timePCR和Western blot法檢測肝臟DGAT2、LXRα、PPARγ、SREBP-1的mRNA表達水平和蛋白表達水平。
　　結(jié)果：（一）人群調(diào)查：天津市靜海縣368名40~60歲人群，該人群血脂異常率、男性和女性血脂異常率分別為28.53%（105/368），31.55%（53/168），26.00%（52/200）；該人群、男性和女性的血清核黃素水平分別為（6.69±0.37）ug/mL、（6

6、.36±0.53）ug/mL、（6.97±0.51）ug/mL；血脂異常人群血清核黃素水平顯著低于血脂正常人群[(5.67±0.57) ug/mLvs.(7.10±0.45) ug/mL，P＜0.05]。
　　（二）動物實驗：1.干預(yù)第40、60天時，0.667mg/kg核黃素劑量組血清TC、LDL-C的水平均低于模型對照組（P＜0.05）。核黃素干預(yù)第60天，核黃素干預(yù)組AI、AIP、TC/HDL-C值均低于模型對照組，僅0.6

7、67mg/kg核黃素劑量組AI值、TC/HDL-C值與模型對照組間差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。核黃素干預(yù)第61天，0.667mg/kg和3.385mg/kg核黃素劑量組血清 ApoB的水平和ApoB/ApoA-1比值明顯低于模型對照組（P＜0.05）；0.667mg/kg和3.385mg/kg核黃素劑量組肝臟 TG水平較模型對照組降低（P＜0.05），0.667mg/kg黃素素劑量組肝臟TC水平較模型對照組降低（P＜0.05）。

8、
　　2.核黃素干預(yù)第61天，核黃素干預(yù)組血清AST、LCAT的水平較模型對照組間差異未見統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；0.667mg/kg核黃素劑量組血清ALT、HMGR的水平較模型對照組低，且差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　3.通過HE和油紅O染色肝臟組織切片，鏡下觀察肝組織切片發(fā)現(xiàn)高脂血癥大鼠各組肝組織均有不同程度損傷和脂肪沉積，但是核黃素干預(yù)組的肝臟損傷程度和脂肪沉積的量較模型對照組低。
　　4. Re

9、al-time PCR檢測結(jié)果顯示：0.667mg/kg和3.385mg/kg核黃素劑量組肝臟DGAT2、SREBP-1的mRNA表達水平較模型對照組降低（P＜0.05）；Western blot結(jié)果表明0.667mg/kg和3.385mg/kg核黃素劑量組肝臟SREBP-1蛋白表達水平較模型對照組降低（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.天津市靜?？h368名40~60歲人群，血脂異常率偏高為28.53%（105/368）

10、，以高TG血癥以主；血脂異常人群血清核黃素水平顯著低于血脂正常人群。
　　2.核黃素可有效降低高脂血癥大鼠血清TC、LDL-C、ApoB的水平、肝臟TC、TG的水平和肝臟細胞內(nèi)脂肪沉積，說明核黃素具有影響脂質(zhì)的作用；核黃素還可以降低AI值和TC/HDL-C的比值。
　　3.觀察不同濃度核黃素對高脂血癥大鼠脂質(zhì)代謝酶LCAT、HMGR，脂質(zhì)代謝相關(guān)因子DGAT2、LXRα、PPARγ、SREBP-1mRNA表達水平和蛋白表達水