叔丁基對(duì)苯二酚干預(yù)STZ誘導(dǎo)型糖尿病大鼠視網(wǎng)膜microRNA的差異表達(dá).pdf

1、目的：探討叔丁基對(duì)苯二酚(tBHQ)對(duì)高脂高糖飲食聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的保護(hù)作用，找出tBHQ干預(yù)后大鼠視網(wǎng)膜差異表達(dá)的miRNA，通過(guò)生物信息技術(shù)分析差異miRNA的作用以尋求tBHQ的潛在保護(hù)機(jī)制，為DR防治提供新靶點(diǎn)。
　　方法：30只體重100-200g(6-8周齡)的雄性Sprague Dawley大鼠隨機(jī)分成兩組：正常組和造模組，正常組予以標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)聯(lián)合腹腔磷酸鹽緩沖液注射，造模組

2、予以高脂高糖飲食喂養(yǎng)聯(lián)合腹腔小劑量STZ(30mg·kg-1)注射建立糖尿病大鼠模型，造模成功后進(jìn)一步分為糖尿病組和tBHQ干預(yù)組，3m后處死各組大鼠。采集大鼠空腹血用于測(cè)定生化和胰島素相關(guān)指標(biāo)，HE染色觀(guān)察大鼠視網(wǎng)膜各層組織變化，使用miRNA表達(dá)譜芯片測(cè)量大鼠視網(wǎng)膜差異性miRNA，PCR驗(yàn)證特定miRNA在三組大鼠視網(wǎng)膜的表達(dá)水平，分析差異性miRNA的相關(guān)通路，并研究差異性miRNAs調(diào)節(jié)的主要生物學(xué)功能，討論差異性miRNA在

3、糖尿病視網(wǎng)膜發(fā)病過(guò)程中可能參與的作用。
　　結(jié)果：三組大鼠的生化值及視網(wǎng)膜HE染色有明顯差異。與正常組大鼠相比，糖尿病組大鼠的空腹血糖值增大，胰島素減少，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.00)。tBHQ干預(yù)組的空腹血糖較正常組顯著升高(P=0.00)，較糖尿病組相比顯著降低(P=0.01)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。tBHQ干預(yù)組的血清胰島素值較正常組減少(P=0.00)，較糖尿病組增多(P=0.00)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HE染色見(jiàn)正

4、常大鼠視網(wǎng)膜表面光滑，各層結(jié)構(gòu)清晰完整，細(xì)胞排列整齊。糖尿病大鼠視網(wǎng)膜出現(xiàn)嚴(yán)重的視網(wǎng)膜水腫，細(xì)胞核層排列紊亂，結(jié)構(gòu)層不清。在tBHQ干預(yù)組中視網(wǎng)膜病理改變輕微。與糖尿病大鼠相比，tBHQ干預(yù)組視網(wǎng)膜中miR-325-3p和miR-551b-3p上調(diào)（＞1.5倍），miR-652-3p下調(diào)（＞2.0倍）。通過(guò)qRT-PCR的驗(yàn)證，最終選定miR-325-3p和miR-551b-3p為差異性miRNA。結(jié)合微陣列實(shí)驗(yàn)和生物信息技術(shù)對(duì)差異性m