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文檔簡介
1、背景:氣道嗜酸性粒細胞炎癥是哮喘的一個關(guān)鍵特征。氣道上皮細胞在氣道嗜酸性粒細胞炎癥中有關(guān)鍵的作用。MicroRNA(miRNA)是非編碼單鏈RNA分子,長度約為20-24個核苷酸,廣泛存在于人體組織器官中,參與轉(zhuǎn)錄后調(diào)控,我們推測氣道上皮細胞 MicroRNA(miRNA)參與的氣道嗜酸粒細胞炎癥的形成。
方法:將8例哮喘患者和4例正常對照的氣道上皮組織的RNA進行miRNA微陣列,并分析12個對象的microRNA表達譜,選
2、出表達改變最明顯的20個microRNA進行分析和PCR驗證,PCR驗證和另外一項納入了21個哮喘患者和10個正常對照的隊列研究均提示了氣道上皮細胞的miR-181b-5p表達下調(diào)。我們通過定量PCR檢測了72例哮喘患者和35例正常對照的血漿miR-181b-5p的表達水平,并對血漿和氣道上皮的miR-181b-5p的表達水平,血漿和嗜酸性粒細胞炎癥進行了相關(guān)性分析。我們通過生物信息學(xué)方法預(yù)測了miR-181b-5p的靶基因 SPP1,
3、并在 BEAS-2B細胞中進行了靶基因的驗證。我們在離體實驗中對miR-181b-5p在炎癥細胞因子IL-1β和CCL11表達中的作用進行了探討。
結(jié)果:哮喘患者氣道上皮miR-181b-5p相對正常對照表達下調(diào),氣道上皮miR-181b-5p表達水平與誘導(dǎo)痰嗜酸性粒細胞計數(shù)和氣道上皮嗜酸性粒細胞炎癥呈負相關(guān)。哮喘患者血漿miR-181b-5p表達也下調(diào)并與氣道上皮miR-181b-5p表達相關(guān)。哮喘患者血漿miR-181b-
4、5p和氣道嗜酸性粒細胞之間呈明顯的負相關(guān)關(guān)系。糖皮質(zhì)激素治療后血漿miR-181b-5p表達上調(diào)。我們證明了SPP1是miR-181b-5p的靶基因之一。在人氣道上皮細胞中,miR-181b-5p通過靶基因SPP1上調(diào)了IL-13誘導(dǎo)的IL-1β和CCL11的表達,IL-13可以誘導(dǎo)miR-181b-5p的表達量下調(diào),地塞米松可以使 miR-181b-5p表達量恢復(fù),并且抑制 IL-13誘導(dǎo)的SPP1,IL-β和CCL11的表達。
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