應(yīng)用聚集誘導(dǎo)熒光探針檢測微藻中汞富集的研究.pdf

1、本論文應(yīng)用一種具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光（AIE）特性的新型熒光染料探針m-TPE-RNS監(jiān)測了裸藻（Euglena gracilis）對Hg2+的吸收與釋放過程，建立了穩(wěn)定、可靠的檢測方法，為研究汞在水生食物鏈中的生物富集效應(yīng)提供了參考。結(jié)果表明：
　　m-TPE-RNS在水和乙腈（ACN）比例為3：2的反應(yīng)體系中，用350nm紫外線（UV）激發(fā)于480nm處有最大峰值；與Hg2+反應(yīng)后，其在590nm處有最大峰值；m-TPE-RNS與H

2、g2+反應(yīng)的熒光強(qiáng)度（PL）與二者濃度比例相關(guān)，呈三維關(guān)系；而當(dāng)Hg2+與m-TPE-RNS的比率小于1時，反應(yīng)體系中Hg2+濃度和PL強(qiáng)度之間呈線性關(guān)系。
　　選擇淡水培養(yǎng)的裸藻為試驗對象，確定了Hg2+對藻細(xì)胞的作用濃度。當(dāng)Hg2+濃度從0增加到30μM時，裸藻細(xì)胞收縮成包囊狀的比例逐漸增加。當(dāng)Hg2+濃度為30μM時，藻細(xì)胞的伸縮泡消失，中心部分變得凝聚并起皺。用10μM、20μM和30μM濃度的Hg2+處理裸藻細(xì)胞1h后，

3、將其轉(zhuǎn)移至清水中，24h后以藻細(xì)胞形態(tài)和游動能力為指標(biāo)計算其恢復(fù)率，各處理組分別為93％、67％、10％。
　　用濃度為10μM和20μM的HgCl2處理裸藻細(xì)胞，經(jīng)過m-TPE-RNS反應(yīng)后溶液中PL強(qiáng)度較對照組有顯著下降，表明藻細(xì)胞吸收Hg2+顯著，之后PL強(qiáng)度變化趨勢漸緩，1h后基本穩(wěn)定。根據(jù)Hg2+濃度與PL強(qiáng)度的關(guān)系，30min時，10μM和20μM的HgCl2處理組中裸藻細(xì)胞的生物富集量分別為0.64μg/mg和1.1

4、3μg/mg。30min到60min，裸藻細(xì)胞中Hg2+的富集量增長不顯著。濃度為10μM和20μM時，相對溶液中，裸藻細(xì)胞中Hg2+的生物富集效率（Et）在1h內(nèi)分別增加至4和5倍。
　　裸藻細(xì)胞在20μM HgCl2中處理45min，然后轉(zhuǎn)移至純水中，在3h和24h分別檢測其中Hg2+含量，為0.02μg/mg和0.013μg/mg。Hg2+在裸藻細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外環(huán)境之間存在動態(tài)平衡關(guān)系，細(xì)胞內(nèi)、外的Hg2+濃度梯度決定釋放的效