環(huán)孢素對(duì)慢性再生障礙性貧血患兒外周血T調(diào)節(jié)細(xì)胞及IL-17基因表達(dá)的影響.pdf

1、再生障礙性貧血(簡(jiǎn)稱再障,Aplastic Anemia,AA)是由理化、生物、藥物和其他不明因素引起的骨髓造血干細(xì)胞數(shù)量下降、造血微環(huán)境損傷導(dǎo)致骨髓造血功能衰竭,出現(xiàn)以全血細(xì)胞(白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板)減少為主要臨床表現(xiàn)的疾病。該疾病對(duì)患者的危害大,病死率高,治療療程長(zhǎng),療效差,在兒童中尤甚。因此,自再障被發(fā)現(xiàn)并報(bào)道以來,人們對(duì)其發(fā)病機(jī)制的探討從未間斷過,但至今依然不是很明了。不過,大多數(shù)國(guó)內(nèi)外學(xué)者們研究認(rèn)為免疫異常在再障的發(fā)病中起著

2、重要的作用。
　　 近年來的研究熱點(diǎn)集中在T調(diào)節(jié)細(xì)胞(regulatory T cell,Treg cell)及Th17細(xì)胞的研究上。T調(diào)節(jié)細(xì)胞是一群具有免疫抑制功能的細(xì)胞,增殖能力低,可以通過識(shí)別自身抗原來抑制具有潛在傷害性的自身反應(yīng)性T細(xì)胞。該細(xì)胞可以控制免疫應(yīng)答強(qiáng)度,維持自身免疫穩(wěn)定,在自身免疫性疾病的發(fā)病中起著重要的作用。叉頭/翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子(foxhead/winged-helix transprcription f

3、actor p3,Foxp3)是CD4+CD25+Treg中得以證實(shí)的的特異性標(biāo)記物,對(duì)CD4+CD25+Treg的分化發(fā)育和發(fā)揮功能起著重要的作用,其在自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展中亦發(fā)揮著重要的作用。
　　 另外,一種新型的T細(xì)胞(Th17細(xì)胞)所分泌的細(xì)胞因子IL-17也被證謇在自身免疫性疾病中扮演著重要角色。IL-17在發(fā)揮作用時(shí)往往是與受體結(jié)合,而后被激活,可以使一系列的趨化因子、粘附分子和集落刺激因子進(jìn)行表達(dá)或釋放,從

4、而影響自身免疫、腫瘤和感染的病理過程。此外,IL-17還能夠使人類造血祖細(xì)胞的增殖過程受到抑制。
　　 環(huán)孢素(cyclosporine A,CsA)作為一種免疫抑制劑,它能有效的抑制T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng),阻斷T細(xì)胞的增殖和分化。
　　 綜上分析,T調(diào)節(jié)細(xì)胞及其細(xì)胞因子Foxp3、Th17細(xì)胞及IL-17A基因均在再生障礙性貧血的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。而環(huán)孢素作為免疫抑制劑,或許會(huì)對(duì)T調(diào)節(jié)細(xì)胞及其細(xì)胞因子Fo

5、xp3、Th17細(xì)胞及IL-17A基因的表達(dá)有一定的影響?；诖?我們?cè)O(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)。
　　 目的:
　　 觀察環(huán)孢素對(duì)慢性再障患兒外周血T調(diào)節(jié)細(xì)胞、Foxp3及IL-17基因的影響,為再障發(fā)病機(jī)制的研究及治療靶點(diǎn)的尋求提供新的理論依據(jù)。
　　 材料與方法:
　　 收集鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院及鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院確診為慢性再障的50例患兒,這些患兒均未進(jìn)行任何治療,將其隨機(jī)分為環(huán)孢素治療組及非環(huán)孢素治療組,分

6、別給予治療6個(gè)月。同時(shí)收集同期鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院健康體檢兒童作為正常對(duì)照組。即研究對(duì)象可分三組:CsA治療組(30例)、非CsA治療組(20例)和正常對(duì)照組(15例)。三組之間性別、年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)各組患兒T調(diào)節(jié)細(xì)胞(CD4+CD25+CDl27lowTreg)在外周血的表達(dá),并采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Foxp3 mRNA及IL-17A mRNA在各組患兒外周血中的表達(dá)。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,

7、數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示,多組樣本均數(shù)比較采用方差分析檢驗(yàn),組間兩兩比較采用LSD檢驗(yàn),以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.CD4+CD25+CD127lowTreg表達(dá)水平:再障CsA治療組為(5.31±1.18),明顯高于非CsA治療組(4.56±0.95),接近于正常對(duì)照組(5.91±1.51);
　　 2.Foxp3 mRNA水平:再障CsA治療組為(1.01±0.26

8、),與對(duì)照組(1.17±0.32)相比,差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而非CsA治療組(0.79±0.34)則明顯低于CsA治療組及正常對(duì)照組;
　　 3.IL-17A mRNA水平:再障CsA治療組水平接近對(duì)照組,兩組比較無明顯差異(P＞0.05):非CsA治療緝的表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組(P＜0＜05);CsA治療組的表達(dá)水平均低于非CsA治療組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.環(huán)孢素可以促